免疫检验第十三讲免疫细胞分离与检测.pptVIP

* 第十三章 免疫细胞分离与免疫细胞 功能检测及应用 【掌握】外周血单个核细胞、淋巴细胞、T细胞亚群分离的原理；T、B细胞、NK细胞主要的表面标志。各种淋巴细胞功能检测的原理. 细胞分离基本原理 不同细胞密度不同 人的红细胞密度为1.093 粒细胞密度为1.092 单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）的密度为1.075-1.090 不同细胞表面生物学特性不同 不同细胞表面分化抗原不同 外周血单个核细胞（PBMC）包括淋巴细胞和单核细胞。 Ficoll分离液法主要用于分离外周血中的单个核细胞，是一种单次差速密度梯度离心的分离法。 密度梯度离心(Ficoll)离心　 二 、淋巴细胞分离（去单核细胞） 贴壁粘附法 （单核细胞贴壁生长的特点、将悬液置玻璃或塑料器皿，未贴壁的为淋巴细胞，此法易造成B流失） 吸附柱过滤法 （单核细胞贴壁生长的特点，将细胞悬液注入装有玻璃纤维或葡聚糖凝胶的层析柱中，洗脱下来的为淋巴细胞） Percoll 分离液法 （连续密度梯度离心，不同密度的细胞悬浮于各自不同的密度区带） Percoll法分离单个核细胞中各细胞成分的分布示意图 E花环沉降法 （T细胞与绵羊红细胞 形成E花环后用淋巴细胞分层液分离， E花环沉在管底） 尼龙毛柱分离法 （B细胞和单核细胞易粘附于尼龙纤维表面，将用HANKS液浸泡后的单个核细胞悬液加入充填有尼龙毛的聚乙烯塑