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2018-12-08 发布于浙江
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第六章常用分子生物学技术原理与其应用.pdf

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第六章常用分子生物学技术原理与其应用

第六章常用分子生物学技术的原理及应用 The Principle and Application of Common Used Techniques in Molecular Biology 目录第一节分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization and Blotting Technique 目录一、分子杂交与印迹技术的原理 核酸分子杂交(nucleic acid hybridization) 在DNA 复性过程中，如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中，或把DNA 与RNA放在一起，只要在DNA 或RNA 的单链分子之间有一定的碱基配对关系，就可以在不同的分子之间形成杂化双链(heteroduplex) 。目录复性 RNA DNA 目录（一）印迹技术利用各种物理方法使电泳胶中的生物大分子转移到NC等各种膜上，使之成为固相化分子。这一技术类似于用吸墨纸吸收纸张上的墨迹，因此称之为“blotting”，译为印迹技术。目录（二）探针技术用放射性核素、生物素或荧光染料标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸链被称为 “探针”，探针可以与固定在NC 膜上的核苷酸结合，判断是否有同源的核酸分子存在。目录二、印迹技术的类别及应用（一）DNA 印迹(Southern blotting) 用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析。（二）RNA印迹(Northern blotting) 用于RNA 的定性定量分析。（三）蛋白质的印迹(Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究。目录 其他：斑点印迹(dot blotting) 原位杂交(in situ hybridization) DNA 点阵(DNA array) DNA 芯片技术(DNA chip) 目录三种印迹技术的比较目录 ② ③ ① 分