HIV-1整合酶活性检测方法的研究进展.pdfVIP

第37卷第5期 北京工业大学学报 V01．37No．5 OFBEIJINGUNIVERSITYOFTECHNOLOGY Mav2011 2011年5月 JOURNAL HIV一1整合酶活性检测方法的研究进展 王存新，陈 霞，何红秋，谭建军 (北京工业大学生命科学与生物工程学院，北京100124) 摘要：HIV—l整合酶介导病毒DNA与宿主染色体的整合，是病毒复制周期中必不可少的环节，抑制整合酶能 有效阻止病毒在体内复制．同时，人体细胞中无整合酶的功能类似物．因此，整合酶是抗HIV一1的理想靶点．近 年来，整合酶活性的体外检测方法得到快速发展，并广泛应用于整合酶活性检测、反应机理研究及整合酶抑制剂 的体外筛选等研究中．本文综述了整合酶活性检测方法的研究进展． 关键词：艾滋病病毒；整合酶；活性检测方法 中图分类号：Q789 文献标志码：A 文章编号：0254—0037(2011)05一0794一07 获得性免疫缺陷综合症(acquiredimmunodeficiency virus，HIV)感染而引起，是一种严重危害人类健康的全球性传染病…．HIV／ (humanimmunodeficiency AIDS相关研究已经进行了近30年，但至今尚未有特效的艾滋病药物或疫苗问世． HIV一1侵染宿主细胞是由吸附、进入、脱壳、逆转录、整合、装配、出芽、成熟等过程组成的，涉及 gpl20、gp41、逆转录酶(reverse 毒蛋白．已有抗HIV一1药物主要是通过抑制靶点蛋白发挥功能而阻断HIV一1生命周期中的某个或某几 个步骤，从而达到抑制病毒复制的目的．目前应用于临床的抗HIV—I药物仍以蛋白酶抑制剂和逆转录酶 抑制剂为主，这类抑制剂容易导致病毒耐药，并且对人体有较强的毒副作用心1。开发新型抗HIV药物已成 为当前HIV／AIDS研究领域的热点． 整合酶作为HIV一1复制过程中的关键酶之一，与人体蛋白无同源性，被认为是抗HIV-1药物的理想 为主，由于没有合适的动物模型，抗艾滋病药物往往直接用于临床，因此体外活性检测成为药物体内实验 和临床药物研究的基础和重要指标．合适的活性检测方法对提高药物筛选的准确性和后续的临床研究等 都具有重要意义． 1 HIV一1整合酶的结构与功能 1．1 HIV-1整合酶的结构 HIV一1的基因组全长约为9．7 terminal kb，两端是序列相同而又不转录的长末端重复序列(10ng 经过剪切后形成整合酶． HIV—l整合酶共含288个氨基酸残基，折叠成3个结构域，分别是N端结构域、核心结构域和C端结 构域(图1)． 1．1．1N端结构域 收稿日期：2009-03—16． 目(2009CB930200)． 作者简介：王存新(1943一)，男，江苏徐州人，教授． 第5期 王存新，等：HIV一1整合酶活性检测方法的研究进展 795 N P,Ol中 (：tail catalytic 64 116 152 l 50 212220 270288 SH3··like zinc·-binding polynucleotidyl·-transfer helix．．1ure．．helix domain domain domain