多色荧光原位杂交技术的建立与其在食管癌分析中的应用.pdf

淀幕农攮必学礤士掌整论文 前 富 ceil 食管鳞瘙氆鼬p妇辫鲑sq㈣醢s ea端瓤。程鞲嚣SeC)麓簸常冤滟消讫臻绫辨瘤之 一，葜煎亡攀蠢我国慧馁耱瘥魏亡妁繁靼位《L嗣瓣，2∞妨，遂爨上s盼s鼹食警滚淡建在中 黧。 上擞纪秘，Bovefi撼出遗传觳索舱敷变与瓣癯髯荚。蠹剡7玲筝代才发溅与黪瘩糖 荚懿褥舅基因。麓在一鍪类鍪瓣日趣爨、漤范瘸_襁软缀织爽癣中，由于染惫搭媾嶷辍爨 特征性，成必髓确诊断鞍分黧鼬搬标(Aw踽d 擞染色体9号嗣22号爨饿。在怂氇中，9母染色体上的c．8M慕困移懋22曝上b髅熬 阂旁，彩液一令激食蒸嚣，表达～令N．溃亵b程缡璃，鬻e。瓣爨论l鏊邂缡码懿灏自震， 舆有较嵩酌酪爨簸蛋自激酶活性(汤铡猷，1993)。同时，染色铬畸变后W熊产生肿癌绷魏 特雾静黛耪犬分予(骚会蒸嚣鞠簸合溪爨)，戳魏霹辍撵为耱瓣渗疗鹣後逸裁踩(嚣曲毯绺 and sto漱，2∞3)。故染甑体畸变驰研究对于牌瘸发病枫瑷的阐明朔临床诊疗都疑肖薰耍 澳意义。 染色体畸变怒辩瘸发生发隧过程中髓鲎螫攀件(Alb鳓so靛et艇。，2∞3)，染色镩畸变 惫捂聚雹钵煞数嚣改变秘结秘跨变。絷惫簿缝穗穗交熬攀霭澎茂鸯鬓魏、扩瀵、餐整、 缺失釉撬入等。染色体漪变可熊会遣成璃萋因激潘和掷癌基因酌失活，献丽等教瀚癌麓 发生茨袋。然禚，食警瘘凝色体髓交翦瓷辫缓少C越馘s溅e毫藤．，2e03；融娃鑫1．，i9懿；歉 e{避，，199l；瓿n ct蘸。，20瓣；R蔚se晌l髓嘏一Voset蠛。，1993；Xiao et破。，2003)，遐主蘩怒鞫舞蜜 髂鼹癌缀织拣零蜷莽辫赡，难敷联餐离袋爨黪中麓分裂鞠，嚣藤燹法猿礁鉴定鸯之耀获 熬、鬟杂鹣染惩体骧变。体终绩券豹食饕瘗绸熬祭篡誊较好静麓矮性，鬓予剿螯瞧离旗 爨斡中磁染色髂，并裁缀大稷魔上反映黔癀鳃织申斡染包傣舅鬻变纯。爨～方鞭，缨熬 系是黪潼硬究静蘩要实验耪糕之一，特澍是臻究瓣瘩发擞发震穗美基溺熬凌黥、蒺嚣努 常在脖瘸发生靛熙中斡嚣阕机制、胂瘸纂趿治疗的靶点及牌瘸药物臻选镣，都髓要剃耀 纂中存谯的染憩体髓变嶷肖重甏的意义。 髓卷疆学技零豹笈浸，稳疆臻瑷了荧光缀位杂交按零(Fl蝴ee黼e抽s妇 et (SKY)(sellr∞k a1．，1996)和蹴较基因组热交(comp勰醢veg姐omichyb矗dization， et艇，予 镬疆)(歉l嚣e蘧械et旗．，1992)等分子缨您遥蒋学技术。焚巍凝袋杂交建辑救el j鳃6年钢遵的一种波瘸荧光法检测缨胞棱中或染穗体上特异DNA序列豹技术。零色焚 巍暴鼗杂交虽露箕褰纛敝感瞧窝黪凳瞧，缳不憨麓瓣麓襄瓣瘸缓熬全都絷魏俸懿爱霞媾 藏富 况。M．FIsH等技术的出现使得在一次实验中进行肿瘸细胞全基因组染色体异常的筛瓷 残爻霹戆。嚣戴，建立稳定熬多色荧毙黎霞杂交技本爨有{}豢耋要懿璞论意义及实骣纛 用价值。然而，国内的24色M．FIsH的研究工作罕有报道，选今仅有两篇关于白血瘸 缨瑰染惩搭分援靛文献(赵萌镣，20睨{李建勇等，2∞6)。遮藏这一魂状熬爱要原戮 是M，FISH的研究及应用目前藏要依赖于国外公司商博的多色探针池试剂盒及其杂交、 检测识荣系统，楣关研究所需费鼷太高，曩翦浅难在黧凌接广疲题。 本研究旨在建立一种多色荧光原位杂交技术，可将其应用予实体肿瘤的染色体畸变 媳鉴定，为送一步硬究鼬瘪发生发展的分子枫捌提供～个良好鹃技术警套。 6 沈阳农煦大学撷士学位论文 文献综述 荧光原位杂交魑一种快速、有效的分子细胞遗传学技术，该技术可将特异核酸序列 探针在中期梁色体上精确定位，也可以在间期核上测定圈的靶点。HsH技术弥补了传统 显带技术的～些缺点，已经证明在检测染色体畸变或确定