化疗介导结肠癌细胞免疫原性死亡的实验研究-内科学专业论文.docxVIP

目 目 录 中文摘要 1 英文摘要 4 研究论文化疗介导结肠癌细胞免疫原性死亡的实验研究 前言月Ij舌 ．8萏 材料与方法 9 结果 ”： 1 2 附图 ·1 4 附表 ·20 讨论 22 结论 ·26 参考文献 ·27 综述 钙网蛋白——实现肿瘤联合治疗的枢纽 29 致谢 36 个人简历 ·37 中文摘要 中文摘要 化疗介导结肠癌细胞免疫原性死亡的实验研究 摘 要 目的：探讨肿瘤化疗药物奥沙利铂(oxaliplatin)、5．氟尿嘧啶(5．FU) 对结肠癌细胞膜表面免疫原性相关蛋白一钙网蛋白(calreticulin，CRT)及 主要组织相容性复合物(MHC I类分子)表达量的影响，寻找能够促使 肿瘤细胞表面CI盯及MHC I有效表达的理想药物浓度，为今后的化疗联 合抗肿瘤免疫治疗提供基本的实验数据和理论支持。 方法：用CCK-8法检测奥沙利铂及5．FU对结肠癌细胞的生长抑制作 用；用流式细胞术检测奥沙利铂及5．FU对肿瘤细胞主要组织相容性复合 物(MHC分子)、钙网织蛋白(CRT分子)的表达的影响；免疫荧光法 检测结肠癌细胞细胞膜表面的CI汀表达。AImexin V／PI检测奥沙利铂、 5．FU不同药物浓度及方式作用于结肠癌细胞24h后的凋亡情况。 结果： 1．CCK-8检测结果：奥沙利铂、5．FU对结肠癌细胞增殖的抑制率均 随着药物浓度的增加而增大。其24h的半数抑制率浓度值(IC50)分别为： 奥沙利铂组2．5 l，5．FU组46．22u∥ml。 2．不同药物对结肠癌细胞膜表面MHC I类分子表达的影响：用 O．01mol／L PBS，2．5 1u∥ml奥沙利铂、46．22u∥ml 5．氟尿嘧啶干预结肠癌细 胞24h后，流式细胞仪检测细胞表面MHC I类分子分子的表达量，相应的 平均荧光强度分别为：PBS组1816．67士22．23；奥沙利铂组2602．Oo士19．52； 5．Fu组3541．Oo士2．oo。分别与对照组两两相比，均有显著性差异(Po．001)。 其中以5．FU的作用较强。 3．不同药物浓度对结肠癌细胞膜表面MHC I类分子表达的影响： 1) 随着奥沙利铂浓度的增加，细胞膜表面MHC I类分子的平均荧光强度也逐 渐增加，各组与PBS对照组两两相比均有显著性差异(PO．001)；各组 药物浓度之间两两相比，也有显著性差异(PO．001)。2)随着5．氟尿嘧 啶浓度的增加，MHC I类分子的平均荧光强度先是逐渐增高，后呈现下降 趋势。各组与PBS对照组两两相比均有显著性差异(PO．001)；各药物 浓度间两两比较，也有显著性差异(PO．001)，IC75浓度较IC50浓度荧 中文摘要光强度下降。 中文摘要 光强度下降。 4．不同药物对结肠癌细胞膜表面CRT分子表达的影响：用 O．01monJBS、2．5 1ug／ml奥沙利铂、46．22ug／m1 5．氟尿嘧啶干预结肠癌细 胞24h后，流式细胞仪检测细胞表面CRT分子的表达量，相应的平均荧光 强度分别为PBS组179．67士2．52；奥沙利铂组255．Oo士5．57；5．Fu组 236．Oo士3．61。各组分别与对照组两两相比，均有显著性差异(Po．05)。 其中以奥沙利铂的作用较强。 5．不同药物浓度对结肠癌细胞膜表面CI汀分子表达的影响：1)随 着奥沙利铂浓度的增加，细胞膜表面CI汀的平均荧光强度也逐渐增加， 各组分别与PBS对照组两两相比均有显著性差异(Po．001)；各组药物 浓度之间两两相比，也有显著性差异， (PO．05)。2)随着5．氟尿嘧啶 浓度的增加，CI汀的平均荧光强度也逐渐增加。各组与PBS对照组相比 均有显著性差异(PO．05)；各药物浓度间两两比较，也有显著性差异， (PO．05)。 6．不同药物对结肠癌细胞凋亡的影响：用O．01m01／L PBS、2．51u∥IIll 奥沙利铂、46．22u幽[Ill 5．氟尿嘧啶干预结肠癌细胞24h后，流式细胞仪检 测细胞凋亡，凋亡平均百分比(％)分别为：27．30士o．75；36．57士O．3 l； 35．Oo士O．66。各组分别与对照组两两相比，均有显著性差异(Po．05)。 其中，以奥沙利铂的作用较强。 7．不同药物浓度对结肠癌细胞凋亡的影响：1)随着奥沙利铂浓度的 增加，结肠癌细胞的凋亡百分比也逐渐增加，各组分别与PBS对照组两两 相比均有显著性差异(PO．05)；各组药物浓度之间两两相比，均有显著 性差异(Po．05)。2)随着5．氟尿嘧啶浓度的增加，结肠癌细胞的凋亡百 分比也逐渐增加，各组分别与PBS对照组两两相比均有显著性差异 (Po．05)；各组药物浓度之间两两相比，也有显著性差异(Po．05)。 结论： 1．以前研究已发现如表阿霉素、米托蒽醌等葸