三物黄芩颗粒抗动物Ⅰ型变态反应及其机制研究.docVIP

三物黄芩颗粒抗动物I型变态反应及其机制研究* 【 】目的运用模型动物观察三物黄岑颗粒的抗 过敏作用，并通过其作用环节的影响，初步探讨其抗过敏机 制。方法用大鼠被动皮肤过敏法建立I型变态反应动物模 型，观察反应蓝斑直径；测定血清中总IgE含量；观察颅骨 骨膜肥大细胞脱颗粒情况及对外源性组胺的拮抗作用。结 果该颗粒大、中剂量组能非常显著地抑制大鼠背部皮肤蓝 色反应斑的直径，能够减低致敏大鼠血清中总IgE含量，大 剂量组与模型组比较差异有显著性。显微镜下拍摄实验大鼠 颅骨骨膜贴片，可见大、中、小剂量组均有一定程度的肥大 细胞脱颗粒现象，但与模型组比较有所减少。该颗粒大、中 剂量组对外源性组胺引起的大鼠瘙痒致痒阈，与正常对照组 比较有明显提高。结论三物黄岑颗粒能有效对抗I型变态 反应，具有良好的抗过敏作用。 【关键词】三物黄苓颗粒；I型变态反应；动物模型； 抗过敏 三物黄岑颗粒源于古方，本课题旨在从实验角度，探讨 三物黄岑颗粒的抗I型变态反应动物模型作用及其机制，从 一个方面为该药的临床提供依据，同时探讨该药治疗I型变 态反应类疾病的可行性。 本次实验在我院动物室进行。实验药物三物黄岑浸膏粉 由四川维奥制药有限公司提供，每克浸膏粉含原生药5g，批 号：030203。临床拟定剂量为每日8g浸膏粉，按成人一般 体重60kg计算，人日用剂量为原生药/kg。设三物黄岑颗粒 大、中、小剂量组g，四川省医学科学院实验动物中心提供， 并配给饲料。合格证号：川实动管质99-32。 实验药物和试剂强的松片：5mg/片，每次5?10mg， 每日10?60 mg,仙居制药有限公司提供，批号：0 20257。 1%卵白蛋白：中国医药集团上海化学试剂公司生产，批号 F2⑻10702。百日咳三联疫苗：成都生物制品研究所提供， 批％伊文思蓝溶液：中国医药集团上海化学试 剂公司生产，批号F2002091 3。 实验仪器、设备ACS-3H -B电子秤：中山市金利电 子衡器有限公司；型离心机：北京医疗仪器修理厂制造。 实验方法 动物分组动物购回后，取体重160?200g健康SD 大鼠50只，按体重随机分为正常对照组、三物黄苓颗粒大 剂量组、中剂量组、小剂量组、阳性对照组5组，每组10 只，雌雄各半。 给药方法正常对照组给予生理盐水，各组均以 lml/100g体重体积灌胃给药，每日1次，连续7天。 剂量设计阳性对照组用强的松5mg/kg，相当 于临床剂量的10倍。 观察指标及测试方法 抗血清的制备取健康SD大鼠5只，用1%卵白蛋白 生理盐水溶液按lOmg/kg肌注射于后腿两侧，同时腹腔注射 百曰咳疫苗2X1010/只。12天后，处死大鼠采血，血液以 500r/min低速离心，分离血清，此血清置冰箱备用。 正式实验各组大鼠灌胃给药，每天1次，连 续7天。第6天用乙醚浅麻醉大鼠，在其背中线两侧、距脊 柱处剪光被毛，每侧剪3点，每点间隔。取上述含IgE的抗 血清，用生理盐水稀释成1:30、1 : 40、1 : 50三种不同稀 释度，按不同浓度抗血清次序，皮内注射于剪毛的各点，每 点。第8天进行抗原攻击：尾静脉注射%伊文思蓝溶液lml， 内含卵白蛋白lmgo经20min后，断颈处死大鼠，剪下背部 皮肤，检查注射各点的蓝色反应斑直径。 实验结果见表1。表1三物黄芩颗粒对大鼠被动皮 肤过敏反应的影响 注：与对照组相比，*P; **P 如表1所示，正常对照组皮斑直径最大，表明造模成功。 三物黄岑颗粒大、中剂量组连续给药7天，能显著地抑制各 个稀释度抗血清引起的大鼠背部皮肤蓝色反应斑的直径，但 不如强的松组g，四川省医学科学院实验动物中心提供，并 配给饲料。合格证号：川实动管质99-32。 实验阳性药物和试剂强的松片、1%卵白蛋白、百日 咳三联疫苗来源同前。苦味酸由广东台山化工厂生产。 实验仪器、设备血清总IgE免疫放射分析测定盒: 北京北方生物技术研究所提供，批号030731。ACS-3H-B电 子秤：中山市金利电子衡器有限公司。型离心机：北京医疗 仪器修理厂制造。 动物分组动物购回后，取体重160?200g健康SD 大鼠60只，按体重随机分为正常对照组、模型组、三物黄 芩颗粒大剂量组、中剂量组、小剂量组、阳性对照组6组， 每组10只，雌雄各半。 给药方法正常对照组及模型组给予lml/100g生理 盐水，各组均以lml/100g体重体积灌胃给药，每日1次， 连续7天。 观察指标及测试方法实验第1天，除正常对照组外， 用卵白蛋白生理盐水溶液按10 mg/kg肌内注射于后腿两侧， 同时腹腔注射百日咳疫苗2X 1010/只，各组按给药方法灌胃 7天。第13天，处死动物采血，血液低速离心，分离血清， 送成都中医药大学附属医院放免科测血清总IgE含量。 实验结果见表2。表