规范《GB2905-1982-_谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法(半微量凯氏法》.pdfVIP

中华人民共和国国家标准 UDC 633.1/.8 谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法 :543.85.06 GB 2905一82 (半微量凯氏法) Methodfordeterminationofcrudeprotein in cerealsandbeansseeds (Semi一microkjeldahlmethod) 1 适用范围 本标准适用于测定谷类、豆类作物种子粗蛋白质含量。 2 仪器、设备 2.1 分析天平:感量。.0001克。 2.2 实验室用粉碎机。 2.3 半微量凯氏蒸馏装置 (推荐使用龙科一A型半微量蒸馏装置)。 2.4 半微量滴定管:容积10毫升。 2.5 硬质凯氏烧瓶:容积25毫升，50毫升 2.6 锥形瓶:容积150毫升。 2.7 电炉:600瓦。 3 试剂 3.1盐酸 (GB622-77)或硫酸 (GB625-77)。分析纯。0.02N、0.05N标准溶液 (邻苯二甲 酸氢钾法标定) 3.2 氢氧化钠 (GB629-77):工业用或化学纯。40 溶液(W/V) 3.3 硼酸一指示剂混合液。 3.3.1硼酸 (GB628-78):分析纯。2%溶液 (W/V) 3.3.2 混合指示剂:嗅甲酚绿 (HG3-1220-79)0.5克，甲基红 (HG3-958-76)0.1克，分 别溶于95写乙醇中，混合后稀释至100毫升。将混合指示剂与2%硼酸溶液按1:100比例混合，用稀 酸或碱调节pH值为4.5，使呈灰紫色。即为硼酸一指示剂混合液。 注:此溶液放置时间不宜过长，斋在一个月之内使用。 3.4 加速剂: 五水合硫酸铜 (GB665-78)分析纯，10克，硫酸钾 (HG 3-920-76)分析纯， 100克，在研钵中研磨，仔细混匀，过40目筛。 3.5 浓硫酸 (GB625-77)比重1.84，无氮。 3.6 30%过氧化氢 (HG3-1082-77):分析纯。 3.7 30%过氧化氢一硫酸混合液 (简称混液):30%过氧化氢、硫酸、水的比例为3，2，1，即在 100毫升蒸馏水中慢慢加人200毫升浓硫酸，待冷却后，将其加人300毫升30 过氧化氢，混匀。 注:此混液可一次配制500-1000毫升贮藏于试剂瓶中备用。夏天最好放人冰箱或荫凉处贮藏，室温 (20C)上、 下时不必冷藏，贮藏时间不超过一个月。 3.8 蔗糖 (HG 3-1001-76):分析纯。 国家标准总局1982一02,一21发布 1983一511一01实施 GB 2905-82 4 试样的选取和制备 4.1 选取有代表性的种子 (带壳种子需脱壳)挑拣干净，按四分法缩减取样，取样量不得少于20克。 将种I放160--65C烘箱中于燥8小时以上，用粉碎机磨碎，95%通过40目筛，装人磨口瓶备 用一’‘ 5 测定步骤 5.1称样 称取0.1克试样两份 (含氮1一7毫克)，准确至。.0001克，同时测定试样的水分含量。 5.2 消煮: 5.2.1将试样置于25毫升凯氏瓶中，加人加速剂粉末。除水稻为1克外，其他均为2克。然后加3 毫升浓硫酸，轻轻摇动凯氏瓶，使试样被硫酸湿润，将凯氏瓶倾斜置于电炉上加热，开始小火，待泡 沫停止后加大火力，‘保持凯氏瓶，f，的液体连续沸腾，沸酸在瓶颈中部冷凝回流。待溶液消煮到尤微小 的碳粒并呈透明的蓝绿色时，谷类继续消煮30分钟，豆类继续消煮60分钟。 5.2.2将试样置于50毫升凯氏瓶中，加人0.5克加速剂和3毫升混液，在凯氏瓶上放一曲颈小漏斗、 倾斜置于电炉七加热，开始小火 (用调压器将电压控制在175伏左右)，保持凯氏瓶中液体呈微沸状态。 5分钟后加大火力(将电压控制在200伏左右)，保持凯氏瓶中的液体连续沸腾。消煮总时间，水稻、高粱为 30分钟，其他均