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课件:细菌的接种和注意事项终极版.ppt
流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌 在巧克力平板上生长,菌落为灰白色,扁平,半透明的小菌落 卫星现象: 当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培养时,靠近葡萄球菌菌落附近可见到流感嗜血杆菌菌落较大,远离葡萄球菌的菌落较小,称为卫星现象。 细菌的接种及注意事项 灭菌接种环 1.要充分灭菌接种环,以免污染其标本 。 2.要适当冷却再取标本,以免带不出标本中的菌种。 取标本 1.蘸取标本时应适量,以免标本太少漏检。 2.液体标本,如尿液,应注意混匀。 接种 1.细菌的接种方法有很多,如平板划线法、斜面接种法、穿刺接种法,等等。但我们用的最多的是: ★平板划线法—意义 指把混杂在一起的微生物,用接种环在平板培养基表面,通过分区划线,稀释得到较多的独立分布的单个菌落,即将样本在固体培养基表面多次做由点到线稀释而达到分纯的目的。 ★ 一区:所占区域大约是平板面积的1/5~1/4 二区:由一区向二区带出三四条平行线 三区:由二区引出三四次,但 三区面积最大 CO2在细菌培养中的意义 1有些细菌在初次分离培养时,需要5﹪-10﹪的CO2。因为细菌在生长过程中能够分解培养基中的某些含氮物质产生氮,对该菌有杀灭作用,而CO2能中和细菌产生的氮,以减少对细菌的毒性。如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布鲁菌等。 2.为细菌提供碳源,促进细菌的生长。如肺炎链球菌,草绿色链球菌。 在细菌室的培养箱上有一个CO2的开关,为什么要用CO2呢? 常见细菌的鉴别及其特点 阳性球菌 葡萄球菌---金黄色葡萄球菌 金葡特点 是人类化脓性感染最常见的病原菌, 可以引起局部感染,也可以引起全身感染。 血浆凝固酶,阳性。 血平板上呈黄色菌落,大而凸起,表 面光滑,有β溶血环。 G+阳性球菌,葡萄状排列,无芽孢,无荚膜。 1. 2. 3. 4. 葡萄球菌---表面葡萄球菌 表葡特点 正常存在于人体皮肤、黏膜表面,多见于院内感染,如体内异物留置,静脉导管等 血浆凝固酶,阴性 表葡形态同金葡相似,但是为白色、扁平菌落,无溶血环 1. 2. 3. 3. 链球菌 常见的链球菌主要有化脓性链球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌 。 根据抗原结构不同可以把链球菌分为A、B、C、D等二十个群,但对人类有致病性的大多数属于A群,少量属于B群。 根据在血平板上溶血分为以下三种: 甲型(α型)溶血性链球菌,又称草绿色链球菌,菌落周围有草绿色溶血环,致病力弱,是条件致病菌。 乙型(β型)溶血性链球菌,产生强烈的溶血毒素,在血平板上可使菌落周围出现2~4mm的无色透明溶血环。 丙型(r-)链球菌,菌落周围无溶血环,又叫不溶血性链球菌,通常不致病。 肺炎链球菌 菌落特点:在血平板上0.5~1.5mm,灰白色半透明,表面光滑,扁平,周围环绕草绿色溶血环,培养放置24h以上的菌落,还会因为产生自溶酶的作用,而致菌落中央塌陷而边缘隆起,呈脐窝状。 肺炎链球菌、A群、B群的区分: Opt试验 抑菌环14, 鉴定为肺链 + 杆菌肽试验 - + - A群 CAMP试验 + B群 Opt实验 杆菌肽实验 11 葡萄球菌与链球菌的鉴别: 1.涂片—涂片革兰染色,葡萄球菌呈葡萄串样,链球菌呈链状。 2.M-H试验—当染片不能区别时,接种到M-H平板,长成菌落之后,可挑单个菌落做触酶试验,+是葡萄球菌,-是链球菌。 肠球菌 肠球菌属特点:G+,成圆球形或椭圆形,单个,成对,或短链,均可。 在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑,0.5~1.0mm大小的菌落,可有溶血现象。 以粪肠球菌和屎肠球菌为常见: 阿拉伯糖 山梨醇 屎肠球菌 阳性 阴性 粪肠球菌 阴性 阳性 阴性杆菌 大肠杆菌:G-杆菌,有鞭毛、菌毛,无芽胞。菌落2~3mm,圆形凸起,灰白湿润,光滑半透明,边缘整齐。某些菌落可产生有透明溶血环。 鲍曼不动杆菌 菌落特点: 圆形、凸起光滑、边缘整齐不透明、灰白色 有粘性的菌落 多数菌落不溶血 在中国兰上为粉红色菌落 菌落特点: 较大菌落、凸起、灰白色黏液型、 相邻菌落容易发生融合 可挑出长丝状细丝 肺炎克雷伯杆菌 变形杆菌 迁徙生长 菌落特点: G-,两边钝圆,有明显的多形性,呈球形或丝状,无芽胞无荚膜,有鞭毛,运动活泼。普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长,迅速弥漫。波纹状薄膜布满整个培养基表面。 嗜麦芽假单胞菌 菌落
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