dec1lxrβ在帕森病中的作用.docxVIP

南京医科大学硕士学位论文分类号：R96 南京医科大学硕士学位论文 分类号：R96 单位代码： 10312 密级： 学 号： 20121 126 南京医科六掌 硕士学位论文 题 研究生： 王宇文 指导教师： 杨俭教授 学科专业- 药理学 学院名称： 基础医学院 完成时间： 二O一五年五月 万方数据 南京医科大学硕士学位论文南京医科大学 南京医科大学硕士学位论文 南京医科大学 lIIII I II II I Illllllll 111 学位论文原创性声明 Y281 7058 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作 所取得的成果。除了文中特另fJ)m以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他 个人或集体己经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和 集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人 承担。 作者签名：旁骘天 日期：加心年0 6，月d易日 翩虢锏硷 日期：刀p～罗年b月b日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权南京医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)： 1、保密口 解密后适用本授权书。 2、不保密 作者签名： 日期：弘心年形月略El 新躲锄金蹴伽歹年b月47日 万方数据 南京医科大学硕士学位论文目录 南京医科大学硕士学位论文 目录 英文缩略词表 1 中文摘要 2 ABSTRACT 4 材料与方法 ．12 结 果 1 8 讨 论 33 参考文献 ．37 综j态 44 攻读学位期间发表文章情况 ．6l 致 谢 ．．62 万方数据 南京医科大学硕士学位论文英文缩略词表 南京医科大学硕士学位论文 英文缩略词表 1 万方数据 南京医科大学硕士学位论文I)EC 南京医科大学硕士学位论文 I)EC 1／LXRp在帕金森病中的作用 中文摘要 研究背景：帕金森病(PD)是一种神经退行性疾病，其显著的病理特点之一是 黑质密质部大量的多巴胺能神经元的缺失。DECl是一种碱性螺旋环螺旋蛋白 (BHLH)转录因子，它在小鼠中的同源基因被称为Stral3，而在大鼠中被称为 Sharp2。DECl参与了机体各种生物学现象，比如神经元的生成。肝x受体B (LXR[3)是核受体超家族基因的一名成员，而且LXR[3选择性的在中枢神经系 统中表达，对于整个生命中大脑皮层的发生以及多巴胺能神经元的生存都是具 有重要意义的。 目的：整体和细胞水平研究DECl在帕金森病发生发展中的作用。 方法：1．利用野生型和MPTP诱导的帕金森病模型小鼠进行对比，并结合DECl 基因敲除小鼠进行整体动物的研究；2．利用免疫组织化学法研究Slxal3(DECl) 和LXR[3在野生型小鼠和帕金森病模型小鼠中脑多巴胺能神经元的表达情况， 以及DECl基因敲除小鼠中多巴胺能神经元损伤情况，和多巴胺能神经元LxRB 的表达情况；3．培养SH．SY5Y细胞，给予两个浓度的MPP+刺激，检测DECl 和LXRD及下游靶基因的蛋白表达水平；4．培养SH．SY5Y细胞，进行DECl 过表达实验和DECl过表达加给药实验，检测LXR[3及下游靶基因的蛋白表达 水平；5．培养SH．SYSY细胞，在基础状态和过表达DECl的情况下分别给予4 个浓度的MPP+刺激，检测MPP+对细胞存活率和凋亡情况的影响；6．MPTP诱 导的帕金森病模型小鼠，整体情况下检测Stral3和LⅪ邛的蛋白表达水平；7．培 养原代小鼠的原代星形胶质细胞，给予两个浓度的MPP+神经毒素刺激，检测 Stral3和LXRIB的蛋白表达水平。 结果：1．野生型小鼠中脑多巴胺能神经元中能检测到Stral3、LXRl3的表达； 2．MPTP诱导的帕金森病模型小鼠，免疫荧光双染结果显示中脑区多巴胺能神 经元较野生型小鼠相比呈现缺失状况，而且Stral3和LXRl3在该区多巴胺能神 经元中的表达量也明显下降；分离中脑组织，Western blot实验结果：TH的表 万方数据 南京医科大学硕士学位论文达量下降约50％(P0．05)，中脑组织中Slral3和LXR[]蛋白水明显增高。由于 南京医科大学硕士学位论文 达量下降约50％(P0．05)，中脑组织中Slral3和LXR[]蛋白水明显增高。由于 脑组织中胶质细胞的数量和体积远远大于神经元细胞，中脑多巴胺能神经元 Stral3表达降低，猜测在中脑胶质细胞中S廿a13表达增加； 3．与野生型小鼠比较，DECl基因敲除小鼠中脑多巴胺能神经元损伤情况严重， 神经元数