d-氨基酸氧化酶定向固定在血红素修饰的碳纳米管上模拟多酶化体系-制药工程专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文数据集中图分类号 学位论文数据集 中图分类号 081419 学科分类号 530．6499 论文编号 1001020161 1 27 密． 级 公开 学位授予单位名 学位授予单位代码 10010 称 北京化工大学 作者姓名 孙建 学 号 2013210380 获学位专业名称 制药工程 获学位专业代码 081302 课题来源 国家自然科学基金 研究方向 酶催化 D一氨基酸氧化酶定向固定在血红素修饰的碳纳米管上模拟多酶催化体 论文题目 系 关键词 ELP—DAAO，hematin，模拟多酶催化 论文答辩日期 2016—5—22 论文类型 基础研究 学位论文评阅及答辩委员会情况 姓名 职称 工作单位 学科专长 指导教师 冯嵬 教授 北京化工大学 生物化工 评阅人1 郑国钧 教授 北京化工大学 药物合成 中国科学院过程 评阅人2 刘春朝 研究员 生化工程 工程研究所 评阅人3 评阅人4 评阅人5 答煳会主席 郑国钧 教授 北京化工大学 药物合成 答辩委员1 王艳东 教授 北京化工大学 生物医学 答辩委员2 王文雅 副教授 北京化工大学 食品工艺 答辩委员3 李灏 副教授 北京化工大学 代谢组学 答辩委员4 刘珞 副教授 北京化工大学 细胞生物学 答辩委员5 注：一．论文类型：1．基础研究2．应用研究3．开发研究4．其它 二．中图分类号在《中国图书资料分类法》查询。 三．学科分类号在中华人民共和国国家标准(GB／T 13745—9)《学科分类与代码》中查询。 四．论文编号由单位代码和年份及学号的后四位组成。 北京化工大学硕士学位论文 摘要D一氨基酸氧化酶定向固定在血红素修饰的碳纳米管上模拟 摘要 D一氨基酸氧化酶定向固定在血红素修饰的碳纳米管上模拟 多酶催化体系 D．氨基酸氧化酶(DAAO)催化D．型氨基酸生成其对应的cL．酮酸， 并伴有副产物过氧化氢产生(H202)。在该实验中，D．氨基酸氧化酶 被修饰连接上一段类弹性蛋白(ELP)，并将该已修饰的酶蛋白固定 到多壁碳纳米管上(MWCNTs)。多壁碳纳米管首先被羟高铁血红素 (hematin)所修饰，再将ELP修饰的DAAO(ELP．DAAO)固定到 已在碳纳米管上的hematin上，这种定向的固定方式使的ELP．DAAO 分子和hematin分子在空间上以分子水平上的距离相靠近。这种分子 距离上的靠近使的ELP．DAAO催化产生的H202能迅速地被hematin 所分解。同时，生成的氧气(02)又充分地被用来氧化DAAO的辅酶 一一还原态的黄素腺嘌呤二核苷酸(R徊)，并产生H202。从而在 ELP．DAAO和hematin之间形成一个从H202_02_H202的循环。 实验结果表明，该循环作为催化体系的推动力加速主反应的进行。从 酶的动力学研究结果可以看出，ELP．DAAO／hematin．CNT催化体系所 展现的催化效率是游离ELP．DAAO的三倍多。由此，我们的研究成 功构建了一个高效的模拟多酶催化的体系。 另外，实验过程中对于该催化体系的构建，运用到了高分辨透射 电镜(TEM)、红外光谱(FT-IR)、紫外可见光光谱(UV-vis)、X． 射线电子能谱(XPS)等手段对其进行了全程表征，实验结果充分的表 北京化工大学硕士学位论文明了该催化体系被成功地构建了。 北京化工大学硕士学位论文 明了该催化体系被成功地构建了。 最后，对于该种高效的酶固定催化体系的进一步研究。一方面关 于固定载体，我们可以用其它的纳米或微米材料来替代MWCNTs。另 一方面对于在本实验中用到的DAAO也可以被其它的氧化酶来替换， 从而形成更多更广泛的模拟多酶催化体系。 关键词：ELP．DAAO，hematin，模拟多酶催化 万方数据 ABSTRACTSPECIFIC ABSTRACT SPECIFIC IMMOBILIZATIoN OF D．AMINo ACID OⅪDASE ON HEML虹Ⅲ．FUNCTIONALIZED SUPPoRT MIMICKING姗LTI-ENZYME CATALYSIS ABSTRACT D—amino acid oxidase(DAAO)catalytic D-amino acid to generate the corresponding alpha keto acid，accompanied by by—product hydrogen peroxide(H202)．In the research，D-amino acid oxidase modified connection an elastin-like polypeptide(ELP)，and the modified enzyme (ELP．DAAO)was imm