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- 2018-12-22 发布于福建
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d9s1122d10s1435d12ata63d17s1301d18s85d20s1082 ministr基因座四色荧光标记分型体系的构建及法医学应用
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如g年。乡月弓乃日
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研究生签名:侯古辛 导师签名:
妒莎年;月如El
中文摘要D9S1122
中文摘要
D9S1122/D10S1435/D12ATA63/ D20S1082/D18S853/D17S1301 miniSTR基因座四色
荧光标记分型体系的构建及法医学应用
摘 要
目的:短串联重复序歹1](short tandem repeats,STR)又称微 卫星DNA,是由1.6个碱基串联重复而成的DNA序列。STR 绝大部分分布于人类基因组非编码区,少数分布在编码区, 平均每6—10kb就有一个STR基因座。由于STR基因座在人 类基因组中分布广泛,具有高度的遗传多态性以及简单快捷 的检测方法而被广泛应用于遗传制图、遗传连锁性分析、肿 瘤研究、人类学、法医学、疾病基因定位、物种多态性研究 等诸多领域。在法医DNA检验中,STR技术已经广泛用于 个人识别和亲权鉴定方面。但对于法医学中一些微量降解的 检材,STR技术并不能成功地得出结论,经常会出现“优势 扩增”或者“无效扩增”,而miniSTR分析技术是将引物设 计得尽可能靠近核心序列来缩短扩增片段长度,因此将其用 于高度降解DNA样本检测可提高个人识别和亲子鉴定中的 检测成功率。MiniSTR基因座已被欧洲DNA分型工作组 (EDNAP)定义为继STR之后的新一代遗传标记,2006年美
国AB公司已经研制开发了miniSTR扩增试剂盒;美国、日 本、西班牙等国家报道了miniSTR D1 S 1677、D4S2364、
D10S1248等基因座的群体遗传学数据及其法医学应用价值, 国内对miniSTR基因座的研究较少,且多是对CODIS系统 内miniSTR基因座进行的调查研究。在人类基因组中已经发
中文摘要现的
中文摘要
现的8000多个STR基因座,并非都适用于设计成miniSTR 基因座,特别是CODIS系统内的部分STR基因座由于等位 基因范围太大,或者侧翼序列不适合设计新的引物,使这些 基因座扩增片段长度很难缩短到理想长度(1 50bp)。本课题 旨在建立两组非CODIS系统的miniSTR基因座D9SI 122、 D10S1435、D12ATA63和D20S1082、D18S853、D17S1301
荧光标记复合扩增体系,对河北汉族人群进行群体遗传学调 查,按照美国DNA分析方法技术工作组(The Technology W少rking Group on DNA Analysis Methods,TWGDAM)的指导
方案进行法医学实用性研究,为DNA数据库的构建及法医
学应用提供基础资料。 方法:本实验所用河北健康无关个体外周静脉血1 15份,
由河北省血液中心提供,基因组DNA的提取采用天根生化
公司的血液基因组DNA提取试剂盒提取;家系调查的检材 来源于法医物证教研室日常亲子鉴定检案,组织同一性检验 的检材来源于法医病理教研室尸检标本,采用Chelex一100法 提取上述检材的DNA;另将静脉血放置于夏季自然环境中1 周、2周、4周、8周模拟降解检材,采用Chelex.100两步法 提取其DNA。将D12A1队63、D17S1301基因座的上游引物 5’端用6-FAM荧光标记,D9S1 122、D20S 1082基因座的上游 引物5’端用HEX荧光标记,D10S1435、D18S853基因座的 上游引物5’端用TAMRA荧光标记。分别对D20S1082、 D18S853、D17S1301与D9S1122、DIOSl435、D12ATA63
进行PCR复合扩增,扩增产物在ABl310基因分析仪上电泳 分型,结果用Genemapper 3.2软件进行分析,利用统计软件 计算各基因座的遗传学参数。
中文摘要结果:建立了
中文摘要
结果:建立了D9S1122、D10S1435、D12ATA63与
D20S1082、D18S8
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