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- 约 82页
- 2018-12-22 发布于福建
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eaal细胞联合全反式维甲酸人肺腺癌细胞株a549体内外作用的研究
河北医科大学
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研究蝴瑚聊麟军承级
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研究生签名:王兹二e餐 导师擗第醒
们心年≥月纠日
万方数据
目
目 录
中文摘要 1
英文摘要 一4
英文缩写 ·8
研究论文EAAI,联合全反式维甲酸对人肺腺癌细胞株A549体内外作用
的研究
引言 ·9
第一部分EA AI.细胞联合ATRA对人肺腺癌细胞株A549体外作用研究 前言翮舌 ·1~1‘
材料与方法 ·12
结果 ·23
附图 28
附表 38
讨论 ·43
刀、结 ·46
参考文献 .46
第二部分E儿也细胞联合ATRA对人肺腺癌细胞裸鼠移植瘤的体内
作用的研究
前言日Ⅱ舌 .48·48
材料与方法 ..49
结果 .53
附图 .56
I;f;}表 .6l
讨论 .63
/J、结 .65
参考文献 65
结论 67
综述过继性细胞免疫治疗在肿瘤治疗中的作用和研究进展 一68
致谢 79
个人简历 80
万方数据
中文摘要EAAk细胞联合全反式维甲酸对人肺腺癌细胞株A549
中文摘要
EAAk细胞联合全反式维甲酸对人肺腺癌细胞株A549 体内外作用的研究
摘 要
目的:观察体外扩增活化的自体淋巴细胞(Expanded Activated Autologouse Lymphocytes,EAAL)与全反式维甲酸(all-tram retinoic acid, An认)联合应用对肺癌细胞株A549及裸鼠肺癌移植瘤的杀伤作用,探
讨两者联合应用的相关机制,为开展有效的肺癌生物治疗提供实验和理论
依据。
方法:1 EAAI,细胞与全反式维甲酸对A549细胞体外作用研究: 实验主要分为4组,依次为Control组,EAAI,组,ATRA组,
EAAL+ATRA组。
(1)光学显微镜下观察各组A549细胞形态学的变化。 (2)SRB比色法检测各组A549细胞生长增殖变化。 (3)细胞划痕实验检测各组A549细胞迁移能力。 (4)流式细胞术检测各组A549细胞周期分布情况。
(5)RT-PCR技术检测A549细胞凋亡相关基因Bcl.2、Bax及Survivin
mRNA的表达情况。
(6)免疫组化技术及western blot检测凋亡相关蛋白Bcl.2、Bax及 Survivin的表达情况。
2 EAAI,细胞与全反式维甲酸对A549细胞裸鼠皮下移植瘤体内作用
研究
裸鼠成瘤后随机分为6组,依次为:空白对照组(生理盐水组)、阳
性对照组(O.5mg/kg,DDP)、ATRA组(15mg/kg)、E舢地细胞组(1
×10 7个/次)、EAAI,细胞与ATRA同时联合应用组、EA AI,细胞与ATRA
序贯联合应用组。 (1)处理过程中,隔日测量裸鼠肿瘤体积,建立各组肿瘤生长曲线;
处理结束后,处死全部裸鼠,完整剥除瘤体,测量肿瘤块儿体积,计算肿 瘤抑制率,比较各组对肿瘤生长的影响,HE染色观察肿瘤细胞形态学变 化。
万方数据
中文摘要(2)免疫组化技术检测各组荷瘤小鼠肿瘤组织细胞的凋亡相关蛋白
中文摘要
(2)免疫组化技术检测各组荷瘤小鼠肿瘤组织细胞的凋亡相关蛋白 Bcl.2、Bax及Survivin的表达情况。
结果:l将E丸地细胞和域ATRA作用于A549细胞48h后,随着
ATRA的浓度和E础地细胞效靶比的升高,A549细胞开始出现皱缩、变 圆、脱落、体积变小及数量减少等形态学方面的改变,并且可见凋亡小体。 而对照组A549细胞大小均匀、生长密集。与对照组相比,E础地细胞或 ATRA单独处理组对A549细胞的形态学方面的杀伤效果显著, EAAL+ATRA组对A549细胞形态学杀伤作用较以上各单独处理组均有明 显增强。
2 SRB实验结果显示,ATRA和EAAI,细胞对A549细胞增殖有显著
的抑制作用(脚.05),并且存在浓度(效靶比)和时间依赖性,ATRA的
最适浓度为10巧mol/L,EAAL细胞的最适效靶比为50:1,并且EAAI,联 合ATRA处理对A549细胞杀伤活性与对照组和单独使用ATRA或E础让 细胞相比,其杀伤活性均明显增加(火O.05)。
3经A
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