GnRH LHR和PR基因多态性及其与荷斯坦牛精液品质的关联分析.docxVIP

GnRH、LHR和PRL基因多态性及其与荷斯坦牛精液品质的关联研究 摘要 根据精子发生的生殖内分泌调节机制和影响精液品质的调控机理，选择参与 精子发生的生殖激素基因及其受体以及与生殖有关的基因作为候选基因，研究这 些基因多态性及其与种公牛精液品质的关联性，并对部分有丰富多态性的基因在 生产中进行验证，旨在寻找与精液品质相关的标记基因，为建立种公牛分子标记 辅助选择新方法提供理论依据。 ． 本研究以GnRH、LHR和PRL作为候选基因，采用PCR-RFLP、PCR-SSCP 和测序等方法，分析了候选基因在四个荷斯坦种公牛群体共计209个样本中的多 态性及其与荷斯坦种公牛精液平均采精量、精子密度、原精活力、冻精活力、顶 体完整率和畸形率等性状的关系，结果发现： 1．GnRH基因外显子2发生A883G突变，引起Hi．fl酶切位点多态性，在四个 来源的荷斯坦种公牛群体均检测到AA、AB和BB三种基因型，A等位基因频率在 抽样群体中占优势地位。性状关联分析发现，AB型个体原精活力显著高于BB型 个体(氏0．05)，推测GnRH基因外显子2 Hinfl酶切位点AB杂合型为优势基因 型，A等位基因可能与原精活力性状呈正相关。 2．LHR基因内含子9发生A51703G突变，引起BfaI酶切位点多态性，在四个 来源的荷斯坦种公牛群体均检测到AA、AB和BB三种基因型，变化趋势为AB型 AA型BB型，A等位基因频率在抽样群体中占优势地位。性状关联分析发现， AB型个体原精活力显著高于AA型个体(氏O．05)，推测LHR基因BfaI酶切位点 AB杂合型为优势基因型。 3．LHR基因内含子9发生G51656T突变，引起Hinfl酶切位点多态性，在三个 来源的荷斯坦种公牛群体均检测到AA、AB和BB三种基因型，而在郑州群体中缺 失AA基因型，其变化趋势为BB型AB型AA型，B等位基因频率在抽样群体中 占优势地位。性状关联分析发现，BB型个体的精子密度显著高于AA型个体 (砌．05)、原精活力性状显著高于AB型个体(尸0．05)、项体完整率性状显著 高于AA型个体，推测LHR基因Hinfl酶切位点BB型为优势基因型。 4．PRL基因外显子4发生G7550A突变，引起船甜酶切位点多态性，来源于 天津和郑州的2个荷斯坦种公牛群缺失BB基因型，四个群体中AA基因型频率高 于AB基因型频率，BB基因型频率最低，A等位基因频率在抽样群体中占优势地  华中农业大学201 l届硕士学位论文 位。性状关联分析发现，不同基因型个体种公牛之间差异不显著(P0．05)，推测 PRL基因该突变位点可能与荷斯坦种公牛的精液品质性状无关。 5．PRL基因内含子4发生C7661T突变，引起么，以酶切位点多态性，来源于上 海和郑州的2个荷斯坦种公牛群缺失BB基因型，四个群体中AA基因型频率高于 AB基因型频率，BB基因型频率最低，A等位基因频率在抽样群体中占优势地位。 性状关联分析发现，不同基因型个体种公牛之间差异不显著(尸0．05)，推测PRL 基因该突变位点可能与荷斯坦种公牛的精液品质性状无关。 6．PRL基因外显子5发生T8370C突变，引起AciI酶切多态性，四个荷斯坦种 公牛群均检测到AA、AB和BB三种基因型，群体中BB基因型频率最高，AA基 因型频率最低，B等位基因频率在抽样群体中占优势地位。性状关联分析发现，不 同基因型个体种公牛之间差异不显著(尸0．05)，推测PRL基因该突变位点可能 与荷斯坦种公牛的精液品质性状无关。 综上所述，种公牛精液品质与GnRH和LHR基因的多态性有关，而与PRL基 因多态性无关。 关键词：荷斯坦牛；精液品质；候选基因；分子标记 II  GnRH、LHR和PRL基因多态性及其与荷斯坦牛精液品质的关联研究 Abstract According to the regulation mechanism by reproductive endocdne of spermatogenesis and sperm quality,the genes of reproductive hormones and their receptors，as well as other reproductiion related genes were selected as the candidates in the present study．The polymorphisms and therir associations wim the semen quality were studied．The purposes of the present study are to analyse the