组织学与胚胎学左第一章绪论.ppt

第一章 绪论 一、组织学与胚胎学的研究内容与意义 1、组织学定义 是用显微镜研究正常人体的微细结构及其与功能关系的科学。 2、组织学研究内容 细胞 ——组织——器官——系统 3、胚胎学定义 是研究出生前的个体发生和生长规律及其发育机制的科学。 4、胚胎学研究内容 受精——卵裂——胚泡——胚层——胎儿娩出 5、意义 组织学是基础医学的一门重要基础学科，是临床医学的基础。胚胎学是优生优育的理论基础，对临床诊治起指导作用。 二、组织学与胚胎学的研究方法 （一）一般光学显微镜技术 光镜分辨率0.2μm 放大倍数几百倍至千倍。 生物制片技术 1、石蜡组织切片；2、冰冻切片； 3、火棉胶切片；4、磨片； 5、涂片； 6、铺片； 石蜡组织切片的过程： 取材——固定——脱水——透明——浸蜡——包埋——切片——染色——封片。 HE染色 （二）组织化学和细胞化学技术 原理：是通过化学反应或物理反应的原理显示组织细胞内某种化学成分，并可进行定位、定性、半定量研究。 如：PAS反应 （过碘酸—希夫反应） （三）免疫组织化学技术 原理：是应用抗原与抗体特异性结合的原理，检测组织细胞内多肽、蛋白质或受体等大分子物质的技术。 直接法：用标记的抗体与细胞的相应抗原特异性结合。 间接法：标记二抗。灵敏度高于直接法。 1.PAP法：其原理是一抗同抗原相结合，二抗既能同一抗相结合，又能同PAP复合物相结合，后者由过氧化物酶和抗过氧化物酶抗体组成，最后以DAB显色。 2.ABC法：是用一抗同抗原结合，生物素化的二抗再与一抗结合，最后用亲合素-生物素-过氧化物酶复合物处理，使复合物同生物素化的二抗结合，显色部位即表明抗原存在的部位。该法比PAP法敏感20-40倍。 （四）电子显微镜技术 分辨率0.2nm，放大倍数几千倍至几百万倍。 1.透射电子显微镜技术 观察细胞内部的结构。 2.扫描电子显微镜技术 观察细胞表面的结构。 （五）冷冻蚀刻复型 是用透射电镜观察组织或细胞断裂面的金属复制膜。组织经甘油处理后快速冷冻（-190℃），高真空下用钢刀将组织劈开，升温至-100℃使组织升华，出现自然的凸凹面。先喷一层铂膜，再喷一层碳膜，以加固铂膜。用次氯酸等将组织腐蚀掉，清理复型，电镜观察。其凸凹结构影像恰与实物相反。此法可以观察细胞膜内部两层脂质分子的结构。 （六）细胞培养技术 将人或动物的活细胞在体外适宜的环境中（如温度、PH值、营养等）培养成活，可以进行细胞增殖、分化、代谢、吞噬及癌变机理等多方面的研究，获得体内实验难以达到的目的。 三、学习组织学与胚胎学应注意的几个要点 （一）理论联系实际 （二）平面与立体的关系 （三）结构与功能的关系 * * 组织学与胚胎学 主讲：赵培荣 苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色 碱性染料 将嗜碱性物质（本身酸性）染成蓝色 酸性染料 将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色 细胞核中的DNA、RNA细胞质中的RNA 细胞质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网） 光镜 HE图片 涂片 多糖 PA 氧化 醛 Schiff 试剂 紫红色沉淀 PAS图片 直接法和间接法图 PAP法 ABC法 电镜 电镜技术过程 电镜图片 (2) 扫描电镜 观察组织C的表面立体结构。 扫描电镜 冷冻蚀刻 倒置相差显微镜 细胞培养图片