实验八对、透射电子显微镜及扫描电子显微镜的使用.pptVIP

* 实验 八-1 细胞超微结构观察与透射电子显微镜的使用 掌握透射电子显微镜的成像基本原理及其应用 实验目的与要求 一、透射电子显微镜的成像基本原理 在真空条件下，电子束经高压加速后，穿透样品时形成散射电子和透射电子，它们在电磁透镜的作用下在荧光屏上成像。 利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化 利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差 不要求真空 不要求真空 要求真空 1.33x10-5～1.33x10-3Pa 玻璃透镜 玻璃透镜 电磁透镜 可见光（400-700） 紫外光 （约200nm) 电子束 （0.01-0.9） 200nm 100nm 0.1nm LM TEM 成像原理 真空 透镜 光源 分辨本领 显微镜 电镜与光镜的比较 ? 超薄切片技术 用于电镜观察的样本制备 ?负染色技术（Negative staining） 染色背景，衬托出样品的精细结构 ?冰冻蚀刻技术（Freeze etching） 冰冻断裂与蚀刻复型：主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒 和膜表面结构。 ?电镜三维重构技术 电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的 具有重要应用前景的一门新技术。 电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振 分析技术相结合，是当前结构生物学（Structural Biology） （主要研究生物大分子空间结构及其相互关系）的主要实验手段。  主要电镜制样技术 超薄切片技术主要包括取材、固定、包埋、切片、染色等步骤。 二、作业:试比较电子显微镜与普通光学显微镜的异同。 实验八 -2 细胞超微结构观察与扫描电子显微镜的使用 利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态。电子“探针”扫描，激发样品表面放出二次电子，探测器收集二次电子成像。 一、实验原理 疟疾破坏的两个红细胞 *