发酵过程的工艺控制-4.pptVIP

1，补料控制目的 解除基质过浓的抑制 解除产物的反馈抑制 解除葡萄糖分解代谢阻遏效应 补充微生物能源和碳源的需要。 补充菌体所需要的氮源。 补充微量元素或无机盐。 前体。 控制微生物的中间代谢，使之向着有利于产物积累的方向发展。 为实现这一目标，在中间补料控制时，必须选择恰当的反馈控制参数和补料速率。 * 发酵的中后期营养物消耗造成微生物所需营养缺乏，我们应采取什么措施？ 增加基础料的营养成分含量 一定阶段补入必要的营养成分 哪个方法更合理？ 四、补料控制 2、补料的内容 3、补料的原则 4 、补料控制 （1）补充微生物所需的能源和碳源 碳源是微生物长菌体时需要量最大的物质，在发酵前期消耗很快，到了产物合成阶段菌体要维持活性必须补充碳源，以便延长产物合成期。 补什么? 怎么补? 例 谷氨酸：在原工艺的基础上，减少初糖浓度，增加生物素用量达5μg/l，加大接种量到10%左右，以利于菌体迅速繁殖，获得生产需要的足够量的菌体。 当进入产酸期，糖耗达2%左右，连续补糖，维持2%左右的糖浓度，提高温度36~370C，流加氨水或尿素，维持pH7.0~7.5，利用菌体所形成的酶系继续进行发酵，产酸可达10%。 后来补糖方法在抗生素发酵中普遍采用。 补糖控制考虑：补糖时间、补糖量、补糖方式 参考数据：糖耗速率、残糖浓度、pH变化、菌体浓度、菌丝形态、发酵液粘度、溶氧浓度等 指标 根据还原糖水平，如赤霉素还原糖降到0.6％就需要补糖， 根据总糖水平，根据菌的酶系和pH变化的大小决定。 注意：不同的发酵阶段控制的残糖浓度不同 补糖时间控制很重要，过早会刺激菌体生长，加速糖的消耗；补糖过迟会使菌体所需要的能量供应跟不上，干扰菌的代谢。 例：四环素 补糖时间 96h效价 20h 6000u/ml 45h 10000u/ml 62h 6000u/ml 补糖时间 说明 开始补糖的时间必须根据代谢的变化情况来决定，根据基础培养基的碳源种类及用量、菌丝生长情况、糖的消耗速率及残留水平来综合考虑，不能单纯以时间为依据。 补糖量的控制，以控制菌体浓度不增或略增为原则，使产生菌的代谢活动有利于产物合成。一般在补糖开始阶段控制还原糖在较高水平，以利于产物合成，但高浓度的还原糖不易维持过久，否则会导致菌体大量繁殖影响产物的合成。一般还原糖水平维持在0.8～1.5％之间较为合适。 补糖量 补料方式可分为：连续流加 少量多次 大量少次 连续流加效果最好，可以避免因一次大量加入引起环境突然改变给菌体代谢带来的影响。 补料方式 （2）补充微生物所需的各种氮源 补氮是发酵控制的另一个重要项目，主要作用是调节pH和补充产生菌所需的氮源，从而控制代谢活动。 生产上补氮有两种： 补充有机氮源 补充无机氮源 通氨、补硫酸铵 补充有机氮源 添加某些具调节生长代谢作用的有机氮源如尿素、酵母粉、蛋白胨、玉米浆，保持菌的活性，补充产物合成所需的氮源。 有时与碳源一起配合补料，工厂称作补混合料。 例：土霉素发酵前期补2~3次酵母粉，放罐单位比对照高1500u/ml。青霉素发酵47小时开始加尿素，每6小时补加一次，结合补加乳糖，发酵单位可达40000u/ml以上。 赤霉素生产补加的氮源是花生粉，配16％的花生粉液体，当菌生长到粘度大于15秒时，说明氮源被消耗很多，就开始补加花生粉。对于含氮的产物的生产特别需要补氮。 补料依据：氨基氮的消耗、菌的浓度、pH 补无机氮源 通氨 通氨是某些抗生素提高产量的有效措施，它的作用是补充无机氮源和调节pH。通氨一般使用压缩氨气或氨水（20%），采用少量间歇添加或自动流加，由空气管道流入与发酵液均匀混合。氨浓度控制通过测定氨的比消耗速率，菌的比生长速率，产物比合成速率，pH值来控制补加速率。 例：林可霉素原来基础培养基中(NH4)2SO4为0.6％，18小时后减少到7mg/100ml，发酵后期缺少氮源。 改进工艺：将基础培养基中(NH4)2SO4减少为0.5％，14.6小时开始补加30％(NH4)2SO4溶液，根据培养液的pH和NH2-N浓度控制补加量。正常情况下NH2-N保持在10mg/100ml以下，平均补加(NH4)2SO41.5%,提高了发酵单位。 补硫酸铵 补氮控制：补氮时间、补氮量、补氮方式 根据氮消耗速率、菌浓度、发酵液粘度、pH决定补料