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采血前初筛检验 湘潭市中心血站 质管科 张锦泉 主要内容 一、ABO血型鉴定 二、乙肝表面抗原（HBsAg）检测 三、血红蛋白含量检测 四、ALT检测 一、ABO血型鉴定 ISBT认可的血型系统有29个，221个抗原。 血型系统：ABO、Rh(D)、MNS、P、kell、lewis、Duff以及kidd等。 临床上与输血关系密切的有ABO血型系统和Rh(D)血型系统。 血型(blood group)是指红细胞膜上特异抗原的类型。 ABO血型系统的分型是由体内A、B抗原和抗体两者共同决定的。 人体内的ABO血型抗原不仅存在于红细胞膜上，而且广泛地存在于很多组织细胞膜和体液、分泌液中【唾液、胃液、精液等】。 人体ABO血型抗体最多的是IgM类天然抗体，在ABO母婴血型不合的妊娠或输ABO不相容的血液后可产生IgG类免疫抗体。  ABO血型鉴定原理： 根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗A和抗B血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原，同时用已知标准A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的天然IgM类抗A或（和）抗B。 红细胞凝集的本质是抗原-抗体反应。 正向定型：标准血清 + 被检红细胞 反向定型：标准红细胞 + 被检血清 结果判定 血型鉴定错误的原因 ①当献血者较多时，献血者急于离开，缩短了抗原、抗体的反应时间，抗原较弱者没有出现结果就判读。 ②责任心：由于工作人员责任心不强，把抗A、抗B交叉搞错等。 ③技术因素：当标本采集技术(手指采血)不过关时，样本血量不足而致抗原量的不足再加反应时间不充分时，初筛时易导致A型、B型错查成O型，或AB型错查成A型或B型;甚至采集手指血时因局部挤压过重因大量组织液的产生而致引起血型的假凝，如O型错查成AB型或A型或B型;少数操作手法不良人员在将血清与血球混匀过程中造成污染，致使A型或B型错查成AB型。 ④实验中温度过高或过低、时间太长、水分蒸发时容易出现串钱状现象。或者某些肝肾疾病，传染病或红细胞沉降速度增快的病人，血中纤维蛋白原增高或为异常蛋白血症，输代血浆血中含大量高分子右旋糖酐，都能使红细胞形成串钱状，被误认为凝集。 ⑤亚型因素：A、B抗原较弱、正定型检测时凝集很弱或不出现凝集，B弱亚血型，加上街头采血点只做正定型，不做反定型，一些抗原较弱的ABO亚型难于检测，而误判为不凝集。 ⑥试剂效价低：标准血清效价太低，亲和力不强，造成定型不准确。如抗A血清效价不高可将A2型误为O型，A2B型误为B型。 ⑦某些受肠道革兰阴性杆菌感染的病人(大肠杆菌O86败血症)红细胞获得了类B抗原，A型病人可误定为AB型，O型误定为B型。因此，近期感染过肠道致病菌的不宜献血。 ⑧流程合理性欠缺：留样贴签过程控制不严密，当工作人员同时采集两个献血者、注意力又不集中、事先又把标签预贴在流样管上时就会导致错型。事实上这种错误不仅是错型原因之一，还对检测结果的正确判断带来严重的后果，且当同型试管倒错时更难于发现，潜在危害更大，严重威胁到血液的安全性。 预防措施 ①加强对血型初筛人员的业务理论和技术操作培训，增强责任心和质量意识，提高检测技能。 ②抗A抗B都是蛋白质，其效价及亲和力会随着时间的推移和保存温度过高而下降，标准血清不用时立即冷藏保存。 ③要有足够的耐心确保反应时间，选择灵敏度高、特异性好的试剂，以减少亚型漏检。 ④使用质量合格的试剂及细心观察结果，就可避免很多不必要的错误。 ⑤献血人员较多时，要保证有足够的工作人员，安排足够的初筛人员及时做好献血人群的分流安排。 ⑥强化采前、采中、采后核对制度。 ⑦优化流程，明确贴签程序与步骤。 ⑧从空间和时间上制造隔离带，防止同时采集留样带来的错型。 总之，只要精力集中，工作认真细致，严格按照标准操作程序进行操作，就可以避免定型错误。 二、乙肝表面抗原（HBsAg）检测 原理：采用胶体金免疫技术在玻璃纤维上预包被金标抗HBsAg单抗(Au-sAbl)、硝酸纤维素膜上检测线和对照线上分别包被抗HBsAg单抗(sAb2)和单抗鼠IgG。检测时样本血清中HBsAg可与胶体金-抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，如为阳性样本，则与检测线预包被的抗体结合形成“Au-sAb1-HBsAg-sAb2”夹心物而凝聚显色，则该试纸条在检测线和对照线位置出现两条紫红线。如为阴性，试纸条只在对照线位置出现一条紫红线。 全血金标法增加了血细胞滤过膜，该膜只允许血清通过，而阻止血细胞的渗透，避免了血细胞的干扰，使检验结果更加准确。全血金标法取末梢手指血80～100μL，滴加到试纸条样品加入端。如果血样过于粘稠，须在样品加入端加入抗凝剂1滴，15～20min内观察结果. 金标试剂在