试验四食品中淀粉的测定方法.doc

实验四 食品中淀粉的测定方法 Method for determination of starch in foods (一)目的 掌握酶水解法测定各类食品中淀粉含量，了解酸水解法。 (二)原理（酶水解法） 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 (三)仪器与试剂 1. 0.5%淀粉酶溶液：称取淀粉酶0.5g，加100ml水溶解，加入数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。 2. 碘溶液：称取3.6g碘化钾溶于20ml水中，加入1.3g碘，溶解后加水稀释至100ml。 3. 乙醚。 4. 85%乙醇。 其余试剂同GB5009.8—85《食品中蔗糖的测定方法》。 (四)操作步骤 1.样品处理 称取2～5g样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50ml乙醚分5次洗除脂肪，再用约100ml85%乙醇洗去可溶性糖类，将残留物移入250ml烧杯内，并用50ml水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20m1淀粉酶溶液，在55～60℃ 2.测定 按GB5009.7—85《食品中还原糖的测定方法》。同时量取50ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白试验。 3.计算 ? 式中：X1——样品中淀粉的含量，%； A1——测定用样品中还原糖的含量，mg； A2——试剂空白中还原糖的含量，mg； 0.9——还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数； m1——称取样品质量，g； V1——测定用样品处理液的体积，ml。 附：第二法酸水解法 1.原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。 2.试剂 2.1乙醚。 2.2 85%乙醇溶液。 2.3 6N盐酸溶液。 2.4 40%氢氧化钠溶液。 2.5 10%氢氧化钠溶液。 2.6 甲基红指示液：0.2%乙醇溶液。 2.7 精密pH试纸。 2.8 20%乙酸铅溶液。 2.9 10%硫酸钠溶液。 其余试剂同GB5009.7—85。 3.仪器 3.1水浴锅。 3.2高速组织捣碎机：1200r/min。 3.3皂化装置并附250ml锥形瓶。 4. 操作方法 4.1样品处理 4.1.1粮食、豆类、糕点、饼干等较干燥的样品：称取2.0～5.0g磨碎过40目筛的样品，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用30ml乙醚分三次洗去样品中脂肪，弃去乙醚。再用150ml85%乙醇溶液分数次洗涤残渣，除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液，以100ml水洗涤漏斗中残渣并转移至250ml锥形瓶中，加入30ml6N盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h。回流完毕后，立即置流水中冷却。待样品水解液冷却后，加入2滴甲基红指示液，先以40%氢氧化钠溶液调至黄色，再以6N盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深，可用精密pH试纸测试，使样品水解液的pH约为7。然后加20ml20%乙酸铅溶液，摇匀，放置10min。再加20ml10%硫酸钠溶液，以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500ml容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液20ml，滤液供测定用。 4.1.2蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品：按1∶1加水在组织捣碎机中捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、晾干，取可食部分)。称取5～10g匀浆(液体样品可直接量取)，于250ml锥形瓶中，加30ml乙醚振摇提取(除去样品中脂肪)，用滤纸过滤除去乙醚，再用30ml乙醚淋洗两次，弃去乙醚。 以下按4.1.1自“再用150ml85%乙醇溶液”起依法操作。 4.2测定 按GB5009.7—85中4.2或7操作。 5.计算 ? 式中：X2——样品中淀粉含量，%； A3——测定用样品中水解液中还原糖含量，mg； A4——试剂空白中还原糖的含量，mg； m2——样品质量，g； V2——测定用样品水解液体积，ml； 500——样品液总体积，ml； 0.9——还原糖折算成淀粉的换算系数。