第三章 方法学选择及评价.pptVIP

5.方法比对试验要点 样本要求：应选择常规检测的新鲜标本作为试验标本 比对方法：用两种方法同时测定一批标本，计算出两种检测方法间测定结果的差异，以此来估计试验方法在测定标本时可能引入的误差原则上，比较方法应具有好的精密度，无已知的干扰物，分析范围至少与实验方法相同。 标本测定：不同检测系统开始检测的时间应相近，且都应在2个小时内检测完毕。 6.方法比对试验结果评价 作图分析：作图法是方法学比较最基本的分析技术，可以直观地初步判断数据的分布特点。可绘制散点图和偏差图 离群点的检查 标本内分析物含量的统计分析检验 线性回归统计　 临床可接受性能判断 7.方法比对试验简易方法 参照CLIS EP15-A2文件《用户对精密度和准确度性能的核实试验—批准指南》（第2版）进行准确度评价。 通过对定值参考物检测，对检测系统的准确度性能进行评价。 8.简易评价程序 选择定值参考物，至少要求测定2个水平，用实验方法重复测定2次，将检测结果与说明书标示值或靶值进行比对。 计算偏倚，以CLIA’88的1/2作为评价标准，偏倚小于CLIA’88的1/2，认为新检测系统的偏倚临床可接受水平，新检测系统或新方法可应用于临床。 返回节目录 二、精密度的评价 精密度（precision）是指测量程序在相同条件下，对同一样本进行连续多次测量所得结果之间的一致性，是表示测定结果中随机误差大小程度的指标。精密度常用标准差或变异系数来描述不精密度，从而度量精密度大小。 （一）精密度检测基本方法 批内重复性试验 日内重复性试验 日间重复性试验 总的不精密度 （二）注意事项 试验标本的选择 （1）标准液简便易得，可制成不同浓度，干扰因素少，可作为评价随机误差的最佳样品。 （2）冻干质控血清稳定、使用方便，适用于进行日间重复性试验。 （3）患者标本或混合血清常用于短时间内完成的试验。 （二）注意事项 分析物浓度的选择 在医学上具有决定性意义的浓度水平 试验样本数量 在试验周期内至少做20个样本的检测 试验条件 要尽量在相同的条件下 返回节目录 三、检测限的评价 检测限是指检测系统可检测出的最低分析物浓度，又称为分析灵敏度 试验样品：空白样品 检测限样品 测定次数：无具体规定，通常测定10～20次。 试验时间：一般做10天检测。 结果计算 检测低限 生物检测限：生物检测限更真实地反映实际检测限浓度水平样本测定的不确定度。 功能灵敏度：功能灵敏度反映了方法能可靠测定的最低浓度。 三、检测限的评价 返回节目录 四、可报告范围 （一）可报告范围 指检测方法可以报告的所有结果范围，包扩分析测量范围和临床可报告范围。 分析测量范围 指患者样本没有进行任何预处理（稀释或浓缩等），检测方法能够直接测定出的待测物的范围 临床可报告范围 是指对临床诊断、治疗有意义的待测物浓度范围。 （二）线性试验 线性试验是指用试验方法对一系列浓度样本进行分析，对检测结果进行直线回归，评价该分析方法能准确报告的最低浓度、最高浓度或能检测到的范围。 1.线性试验基本步骤 试验样本 （1）混合患者血清 （2）在混合患者血清中加入一定量的待测物 （3）经过特殊处理的混合人血清 （4）标准品、商品化质控物或能力验证材料 1.线性试验基本步骤 样本数量：一般采用浓度从低到高的5～6份样品。 样本测定：全部试验在同一工作日内完成 样本浓度范围： 应覆盖待评线性范围的上、下限。 评价结果不满意时应重新设定浓度。 线性范围内至少应保留有4个浓度。 2.线性实验统计学处理 离群点检查：观察结果有无明显的数据错误，若有明显异常时，应判断是否为离群点，如离群点超出2点，则保留全部数据或重做全部实验。 以分析物浓度(已知)为Y轴，测定均值为X轴，绘制X-Y线性图，目测分析测量范围。 2.线性实验统计学处理 若所有实验点在坐标纸上呈明显直线趋势 用直线回归统计方法对数据进行处理，得直线回归方程Y=bX+a 理想状态下，预期值和实测值间呈通过原点、斜率为1的回归线，即b为l，a为0 离群点检查 用于特定浓度Y值离群点的检验。 将4个重复值从大到小排列（Y1到Y4）。 计算：D = Y1 - Y4 若Y1可能是离群点，计算： D1 = （Y1 - Y2）/ D 若Y4可能是离群点，计算： D4 = （Y3 - Y4）/ D 返回章目录 五、参考区间的验证 参考区间的验证通常检测至少20例健康自愿者 无已知疾病、能够走动、无任何用药、体重在健康范围的标本 选择合适的统计方法确定95%的参考范围，若在推荐的参考范围内，或仅有5%的数据超出推荐的参考范围 本章小结 临床实验室方法的选择与评价，直接影