2018年分子伴侣在蛋白质复性中的应用.docVIP

分子伴侣在蛋白质复性中的应用 　　分子伴侣及其在蛋白质复性中的应用** 　　张佳艺 关怡新 姚善泾* 　　(浙江大学化学工程与生物工程学系 杭州 310027) 　　摘 要 E.coli 　　作为目前应用最为广泛的原核表达系统 　　蛋白质复性 　　基因工程蛋白产业化的瓶颈 　　本文针对这一技术 　　及在蛋白质复性中的应用情况 　　关键词 分子伴侣 复性 纯化 热休克蛋白 GroE 　　各种分子伴侣体系的作用原理 　　已成为 　　Molecular Chaperone and Its Application 　　in the Renaturation of Proteins 　　Zhang Jiayi, Guan Yixin, Yao Shanjing 　　(Department of Chemical and Biochemical Engineering Hangzhou 310027) 　　Abstract Inclusion bodies are easily formed when recombinant proteins are expressed in E.colisystem, and how to renature these inclusion bodies is now becoming the key problem in the geneticengineering. The protein refolding assisted by the molecular chaperone systems is promised to improve theprotein renaturation efficiency. Some kinds of molecular chaperone systems and their functions as well werereviewed in this paper. Meantime, the mechanism and applications of molecular chaperone systems in therenaturation of proteins were presented. The artificial molecular chaperone systems were also brieflyintroduced. 　　Key words Molecular chaperone, Renaturation, Purification, Heat shock protein, GroE 　　随着基因工程技术的发展达系统 　　真核表达系统如大肠杆菌表 　　在这些表达系统中 　　但除了少数重组蛋白本身含有信号肽 　　如酵母羟肽酶 　　Y 　　?Y1à?? 　　??ê?°??ú2ú?? 　　??±í′?μ?2ú??′ó??óD80%以 　　能够分泌到胞外去上是以包涵体形式存在的 　　近几年来 　　如何从包涵体中得到所需的有活性的重组蛋白 　　即蛋白质复性 　　高效 　　*联系人 E-mail: yaosj@che.zju.edu.cn 　　???-ê?×?è????§?ù?e×ê?ú????(201099) 　　4 　　出现了各种复性方法 　　张佳艺 女2001-10-12收稿 　　硕士生 　　国家自然科学基金资助项目 　　疏水色谱柱[1] 　　复性得注意的是 　　这一点 　　提高复性效率 　　Lacksey 　　首先发现 　　蛋白就是分子伴侣 　　加入PEG[3]复性等 　　才具有生物活性 　　pH 　　ò?D??¨??μè 　　但值很难达到 　　能够帮助新生肽进行折叠 　　这种 　　使一些体系的复性率达到80 　　±?????òa?ééü·?×ó°é???°???úò?°üo-ì?D?ê?±í′?μ???×éμ°°×?′D??Dμ?ó|ó? 　　Ellis正式提出分子伴侣在功能上的定义 　　分子伴侣的功能是帮助含多肽结构的其他物质在体内进行正确的非共价的组装 　　凡是具有此功能的蛋白质都 　　是分子伴侣菌 　　分子伴侣除了复性这一主要功能之外通路和转录 　　参与微管的形成与修复等功能[4] 　　调控信息传导 　　目前已发现的分子伴侣的种类如表1[4,5]所示 　　还有一些分子伴侣不属于以上几类 　　-晶状蛋白 　　[6] 　　取自冰核 　　?ü?úμ°°×?êμ?D?3é1y3ì?D°??úμ°°×?ê??DD?yè·??μt 　　ì??ú?′D??÷òaê??ú1¤3ì?ú?à??1y3ì?Dí?ê±?óè?·? 　　×ó°é??μ??ùòò??DD12±í′? 　　从而