05蛋白吧质iii.pptVIP

蛋白质（III） ——蛋白质的主要研究技术 蛋白质的性质 胶体性质 蛋白质分子直径在1~100nm范围内 透析：根据蛋白质分子大于一般小分子物质的特点，可以利用半透膜把蛋白质与小分子分开 丁达尔现象 水化现象 吸附现象 酸碱性质 等电点与电场迁移 蛋白质在等电点附近溶解性最小，电场中不迁移 一般情况下，大分子蛋白质的等电点是不能直接利用氨基酸侧链基团推算。 蛋白质的颜色反应（p35） 双缩脲反应：与CuSO4碱性溶液反应，生成紫红色或蓝紫色的复合物，540nm处有最大光吸收。 米伦反应：蛋白质与硝酸汞、亚硝酸汞、硝酸、亚硝酸的混合液反应生成白色沉淀，加热后变为红色，这是酚类化合物的反应（Tyr） 乙醛酸反应：蛋白质溶液加入乙醛酸，并沿试管壁慢慢注入浓硫酸，两液层之间会出现紫色环，这是含吲哚基化合物的反应（Trp），明胶一般无此反应 坂口反应：蛋白质加入次氯酸、?-萘酚、氢氧化钠可以生成红色化合物，胍基反应（Arg） 酚试剂：福林（Folin）试剂，酚基（Tyr）可以把磷钼酸、磷钨酸还原成蓝色化合物，Lowry法。 光吸收性质 蛋白质在280nm处有强烈的光吸收 Phe、Tyr、Trp Trp贡献最大 蛋白质的沉淀与变性 沉淀作用 蛋白质胶体溶液的稳定性与它的分子量大小、所带的电荷和水化作用有关 改变溶液的条件将影响蛋白质的溶解性质，在适当的条件下，蛋白质能够从溶液中沉淀出来 可逆沉