杨学明《微生物与免疫学》医学免疫学实验第一次实验.pptVIP

BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential. | * 【原理】 用已知的颗粒性抗原悬液与经连续倍比 稀释的待检血清混合，在适当条件下反应， 观察有无凝集现象对血清抗体的存在做出判 断；并结合凝集程度与血清稀释度判定血清 抗体的效价，此法属于半定量试验。 BEA Confidential. | * 【材料】 1.诊断菌液：伤寒沙门菌菌液 2.待检血清：伤寒沙门菌免疫血清 3.生理盐水 4.U型反应板、移液器、水浴箱等 BEA Confidential. | * 【方法】 1.编号： 取一块U型反应板，选8个连续的孔，依次编号。 2.加生理盐水： 用移液器吸取生理盐水，第一孔加0.9ml，其余每 孔各加0.5ml； 3.加血清： 用移液器吸取伤寒免疫血清0.1ml，加入1号孔，并 吹吸3次，使血清与生理盐水充分混合。 BEA Confidential. | * 4.倍比稀释： 从1号孔中吸取0.5ml注入2号孔并混匀，以此类推 直至7号孔，再从7号孔中吸取0.5ml弃去。 5.加抗原： 移液器换吸头，吸取伤寒沙门氏菌菌液，从生理盐 水孔开始，每孔各加入0.5ml伤寒菌液。 6.孵育： 摇匀，置于37℃水浴箱中18-24h后观察结果。 BEA Confidential. | * 1：20 1：40 1：80 1：160 1：320 1：640 1：1280 0.9ml 0.1ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml BEA Confidential. | * 【结果观察】 １.观察之前切勿摇动，以免凝集块分散。 ２.先观察对照孔，此孔应无凝集现象，孔内液体仍 成混浊状态。但如放置时间较长，细菌堆于孔底 成小圆点状，为阴性反应。 BEA Confidential. | * ３.试验孔应自第１孔观察起，如有凝集时则于孔底 有不同大小的圆片状边缘不整齐的凝集物，上液 则澄清透明或不同程度混浊。 “＋＋＋＋” 管内上液完全澄清，完全沉于孔底； “＋＋＋” 孔内上液不完全澄清，稍浑浊， 凝集物大部分沉于孔底； “＋＋” 上液体较浑浊，孔底仍有明显凝集； “＋” 孔内液体混浊，仅少量凝集块沉于孔底； “－” 孔内液体和对照孔同样混浊，无凝集块。 BEA Confidential. | * 4.记录观察的结果并判定凝集效价，通常以能产生 明显凝集（＋＋）的血清最大稀释倍数作为该血 清的凝集效价。 如血清的最低稀释度（即第1管1∶20）仍无凝集， 应报该血清效价低于 1∶20 。 如血清的最高稀释度（即第7管1∶1280）仍显完 全凝集现象，应报该血清效价高于1∶1280。 BEA Confidential. | * 要写明班级、学号、姓名、实验日期 实验一 直接凝集试验 一、实验目的 二、实验项目 （一）直接玻片凝集试验 1. 原理 2. 材料 3.方法及注意事项 4.结果及讨论 （二）直接试管凝集试验 1. 原理 2. 材料 3.方法及注意事项 4.结果及讨论 实验报告的格式和要求 BEA Confidential. | * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidential * BEA Confidentia