人视网膜色素上皮细胞脱分化模型的建立.PDFVIP

第35卷第6期 同济大学学报(医学版) V01．35NO．6 JOURNALOFTONGJI Dec．，2014 2014年12月 UNIVERSITY(MEDICALSCIENCE) doi：10．3969／j．issnl008—0392．2014．06．001 ·基础研究· 人视网膜色素上皮细胞脱分化模型的建立 王敏利1,2,3，吕立夏1，2”，徐国彤1’2’3 (1．同济大学附属第十人民医院眼科，上海200072；2．同济大学医学院眼科研究所，上海200092 3．同济大学医学院再生医学系，上海200092) 【摘要】目的建立人视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium，RPE)细胞脱分化的模型，体外模拟增生性玻璃体 视网膜病变(proliferative transition，EMT)过 程。方法将ARPE一19细胞培养在无血清、含N2和NEAA的petridish中，建立RPE的EMT模型，采用倒置荧光显 微镜观察细胞形态的转变，采用基因芯片和定量PCR来检测EMT相关基因的表达，采用Westernblotting和ELISA 来检测相关蛋白的表达。结果ARPE一19细胞在建模后形态明显发生了改变，基因芯片和Q-PCR检测显示一些与 平上显示建模后细胞表达的TGF-181，IL．15，和EGF蛋白明显增多，Westernblotting显示Vimentin蛋白的表达也显著 上调。结论ARPE．19在N2和NEAA的petridish中培养可以诱导EMT的发生。 【关键词】上皮一间质转变；视网膜色素上皮细胞；增生性玻璃体视网膜病变 【中图分类号】R774．1【文献标志码】A【文章编号】1008—0392(2014)06—0001—05 Establishmentofhumanretinal EMTmodel pigmentepithelium(RPE)cell WANGMin．1i 1-2”，L驴厶．xial2…，XUGuo．ton91’23 (1．Dept．ofOphthalmology，TenthPeople’SHospital，TongjiEyeInstitute，Tongji 200072，China； University，Shanghai 2．Dept．ofRegenerativeMedicine，TongjiUniversity，Shanghai200092，China； 3．Dept．ofRegenerativeMedicine，TongjiUniversity，Shanghai200092，China) To all establish ofhuman 【Abstract】Objective transition(EMT)model epithelialmesench)‘mal retinal Humanretinal ARPE一19cells pigmentepithelium(RPE)cells．Methods pigmentepi