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  • 2018-12-27 发布于河北
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TOPO克隆

Powerful PCR Cloning Tools Topo TA 克隆方法(Topo TA Cloning Kit) Topo TA 克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T4连接酶把PCR片断连接到T 载体上,而Topo TA Cloning用的是DNA Topoisomerase。 Topoisomerase 的用途一般使用在复制 DNA 前把超螺旋 DNA 切割使之解旋后,再连接成线性 DNA。 Topo TA克隆即使用Topoisomerase高效连接的特性把含3`A端的PCR扩增片断快速连接到3`T 端载体上,整个反应只需五分钟!一般 T4 连接酶需过夜才能高效连接。Topo TA 克隆系统提供 Topoisomerase I载体,感受态细胞,SOC培养基等。 Topo 平端克隆方法和长 PCR 片断克隆法(Zero Blunt Topo PCR Cloning Kit)(Topo XL PCR Cloning Kit) 因为越来越多高确限度热稳定酶如 Pfx、Pfu 被用于 PCR 扩增,使到 PCR 后都只是平端产物。这种 平端克隆往往效率低,并且有非特异性背景菌落产生,造成筛选困难。 Topo 平端克隆主要改良载体设计,把

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