细胞自噬与卵巢癌SKOV3细胞及其耐药株SKOV3DDP对顺铂.PDFVIP

862 　　肿瘤2013 年10 月第33 卷第10 期　TUM OR Vol. 33, October 2013 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.10.003 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 细胞自噬与卵巢癌SKOV3细胞及其耐药株SKOV3/DDP对顺铂敏感性 的关系 吴小华，陈亚楠，杨　波，周　楠，王　娜，许鹏宇 中国人民解放军白求恩国际和平医院妇产科，河北石家庄　050082 [摘要]　目的：探讨细胞自噬与卵巢癌SKOV3 细胞及其顺铂 （cisplatin ，DDP ）耐药株SKOV3/DDP 对DDP 敏 感性的关系。方法：在透射电子显微镜下观察SKOV3 和SKOV3/DDP 细胞的自噬体形成情况；MTT 法筛选自 噬抑制剂3- 甲基腺嘌呤 （3-methyladenine ，3-MA ）对SKOV3 和SKOV3/DDP 细胞的无毒剂量，并检测3-MA 联合DDP 干预后SKOV3 和SKOV3/DDP 细胞对DDP 敏感性的变化；分别采用FCM 法和蛋白质印迹法检测单 用DDP 和3-MA 及DDP 联合3-MA 作用后，SKOV3 和SKOV3/DDP 细胞的凋亡率和自噬标志蛋白微管结合 蛋白1 轻链3 （microtubule-associated protein 1 light chain 3 ，MAP1LC3 ，LC3 ）和自噬相关蛋白Beclin1 的表达。 结果：透射电子显微镜下观察可见SKOV3/DDP 细胞内有多个自噬体形成，SKOV3 细胞内仅可见少量自噬体形 成。与DDP 单独作用相比，DDP 联合3-MA 作用时DDP 对SKOV3/DDP 细胞的半数抑制浓度 （half inhibitory concentration ，IC μ μ 50 ）值由（17.71 ±0.15 ）g/mL 下降到（8.85 ±0.11 ）g/mL （P ＜0.05 ），细胞凋亡率由（6.93 ±0.94 ）% 提高到 （14.82 ±0.85 ）% （P ＜0.05 ），LC3 和Beclin1 蛋白的表达水平明显下调 （P ＜0.05 ），而SKOV3 细胞无 明显变化。结论：卵巢癌DDP 耐药性的形成可能与自噬水平增高有关，抑制细胞自噬可以增强SKOV3/DDP 细 胞对DDP 的敏感性。 [关键词]　卵巢肿瘤；自噬；顺铂；耐药；3-MA [中图分类号]　R737.31 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2013) 10-0862-06 The relationship between autophagy and the sensitivity to cisplatin in ovarian cancer SKOV3 and SKOV3/DDP cells WU Xiao-hua, CHEN Ya-nan, YANG Bo, ZHOU Nan , WANG Na, XU Peng-yu Department of Obstetrics and Gynecology, Bethune International Peace Hospital of the Chinese People’s Liberation Army, Shijiazhuang 050082, Hebei Province, China [A BSTRACT]　Objective: To investigate the relationship between the autophagy and the sensitivity to DDP (cisplatin) in epithelial ovarian cancer SKOV3 and SKOV3/DDP cells. Methods: The formation of autophago