大肠杆菌AFP111利用玉米粉全水解液厌氧发酵合成丁二酸.PDFVIP

第 １３卷第３期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ１３ Ｎｏ３ ２０１５年５月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｍａｙ ２０１５ － ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊｉｓｓｎ１６７２ ３６７８２０１５０３００３ 大肠杆菌ＡＦＰ１１１利用玉米粉全水解液 厌氧发酵合成丁二酸 张汉文，刘嵘明，梁丽亚，姜　 岷，马江锋 （南京工业大学 生物与制药工程学院 材料化学工程国家重点实验室，江苏 南京 ２１０００９） 摘　 要：利用双酶法制得的玉米粉糖液及制糖过程中玉米糖渣酶解后含氮水解液作为发酵培养基，考察在不添加 其他营养物质条件下大肠杆菌（Ｅｃｏｌｉ）ＡＦＰ１１１专一厌氧发酵产丁二酸的可能性。 结果表明：Ｅｃｏｌｉ ＡＦＰ１１１厌氧 发酵４８ｈ后，丁二酸质量浓度达到１５２４ ｇ／ Ｌ，丁二酸的得率为０７６ｇ／ ｇ。 与在ＬＢ培养基中发酵相比，产量提高了 １４４１％。 对关键酶酶活和辅因子ＮＡＤ（Ｈ）含量的测定结果显示，能利用玉米粉全水解液的苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、 磷酸烯醇式丙酮酸（ＰＥＰ）羧化酶（ＰＰＣ）、ＰＥＰ羧化激酶（ＰＣＫ）酶活及辅因子ＮＡＤ（Ｈ）含量分别为０８８ Ｕ、０２９ Ｕ、 ０３１Ｕ和１５０９ μｍｏｌ／ ｇ，均比ＬＢ培养基中关键酶酶活和辅因子ＮＡＤ（Ｈ）含量高。 由此推测，玉米粉全水解液中关 键生长因子（Ｄ 生物素、ＶＢ 和烟酸）的含量影响了关键酶酶活和辅因子ＮＡＤ（Ｈ）的含量，从而影响丁二酸的产 １ 量。 在５ Ｌ罐中厌氧发酵１２０ ｈ，利用玉米粉全水解液，丁二酸的得率为０８４ ｇ／ ｇ，比利用ＬＢ培养基发酵得到的丁 二酸得率提高了２１７４％。 关键词：玉米粉糖液；玉米渣；大肠杆菌；丁二酸；厌氧发酵 － － － 中图分类号：ＴＱ９２１　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２ ３６７８（２０１５）０３ ００１４ ０６ Ｓｕｃｃｉｎｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ ｏｆ ｃｏｒｎ ｆｌｏｕｒ ｂｙ ａｎａｅｒｏｂｉｃ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｗｉｔｈＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＡＦＰ１１１ ＺＨＡＮＧ Ｈａｎｗｅｎ，ＬＩＵ Ｒｏｎｇｍｉｎｇ，ＬＩＡＮＧ Ｌｉｙａ，ＪＩＡＮＧ Ｍｉｎ，ＭＡ Ｊｉａｎｇｆｅｎｇ （Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ⁃Ｏｒｉｅｎｔｅｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｔｅｃｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１０００９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ａｉｍｅｄ ｔｏ ｕｓｅ ｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ ｏｆ ｃｏｒｎ ｆｌｏｕｒ ａｓ ｍｅｄｉｕｍ ｉｎｓｔｅａｄ ｏｆ ｌｙｓｏｇｅｎｙ ｂｒｏｔｈ （ＬＢ） ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｕｃｃｉｎｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ ｏｆ ｃｏｒｎ ｆｌｏｕｒ ｃｏｎｔａｉｎｓ ｔｗｏ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ．Ｔｈｅ ｇｌｕｃｏｓｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ ｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｔｗｏ ｅｎｚｙｍｅｓｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｏｆ ｃｏｒｎｆｌｏｕｒｗａｓｕｓｅｄａｓｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｒｎ ｒｅｓｉｄｕｅ ｈｙｄｒｏｌ