Sox9基因转染兔骨髓间充质干细胞治疗兔退变椎间盘的实验分析.pdfVIP

中文摘要 Sox9基闪转染兔骨髓问充质十细胞治疗兔退变椎问盘的实验研究 量为209l。术后定期行X线及MRI检察，观察椎f’日J隙高度指数和髓核T2像信号变化。 12周后取材，通过免疫组化检测II型胶原表达情况。分光度法检测蛋白多糖的含量变 化。 结果 1．实验组术后4周MRI观察到髓核信号降低，术后12周发现椎间隙高度和髓核信 号明显降低，退变明显。免疫生化结果显示实验组II型胶原和蛋白多糖含量较对照组 明显减少(P0．05)。 2．体外分离、培养和传代的兔MSCs具有增殖快，可重复性强等优点，是较理想 的组织工程种子细胞之一。 3．Sox9慢病毒载体转染MSCs后在倒置显微镜下细胞呈多角形，胞体增大，生长 良好，胞内充满绿色荧光物质，转染率为90％以上。经MTT法和流式细胞仪检测发现 转染对细胞的增殖以及细胞凋亡率无影响。Western．blot检测结果显示基因转染组 Sox9蛋白表达明显高于空白对照组和空慢病毒载体转染组。 4．术前，术后第4、8、12周行X线及MⅪ检查，对照组随着时间的推移椎问隙高 度和髓核信号进行性降低；MSCs组椎间隙高度及髓核信号出现轻度降低；基因转染 组椎间隙高度及髓核信号未见明显降低。免疫生化检测发现II型胶原、蛋白多糖的含 量在基因转染组最高，MSCs组次之，对照组最低。基因转染组疗效优于MSCs组(P O．05)。 结论 1．纤维环后外侧穿刺髓核抽吸法可建立兔退变椎间盘模型。 2．移植Sox9基因转染后的MSCs可以有效抑制兔椎问盘的退变，促进椎间盘的修 复，疗效优于单纯移植MSCs。 关键词：骨髓间充质干细胞；Sox9基因；椎问盘退变； 基因转染 作 者：刘 勇 指导教师：陈亮 Sox9螭i大1转染兔骨髓问充质十细胞治疗兔退变椎问盘的实验研究 英文摘要 cell The ofbone stem study mesenchymal experimental in of transferredSox-·9 treatmentrabbit by gene intervertebraldisc degenerative Abstract objective Toestablisharabbitmodelof intervertebraldiscinduced degenerative bypuncturing theannuluswithneedleand somenucleus fromtheintervertebraldiscs． aspirating pulposus Andtoevaluatetheeffectofbone stemcelltransferredlentivirus—sox9 mesenchymal by intervertebral constructureintreatmentofrabbit disc． degenerativ