微导管法建立大脑中动脉闭塞性兔脑缺血-再灌注模型.pdfVIP

逛边人学医学院帧I学位论文 材料oJ疗}上 1．3线栓的制备 依照文献’‘取市售3号钓鱼线赢径O．28哪，前端烧圆，涂一薄层硅橡胶，垂自魁扑 晾干．取头端圆润光滑且直径在O．jm者，在距离头端6．0cm处做标庀，消毒备刚， 1．4动物模型的建立 碱。耳缘静脉穿刺建立静脉通道，以氯胺酮jmg／kg体重静脉推注，麻醉生效后，i}。：， 定于操作台上，颈部备皮，1％利多卡因局部麻醉，取颈正中切口，钝性分离胸锁乳；乏叭 与胸骨舌肌之间的肌『8J隙，在甲状软骨水平暴露颈总动脉和迷走神经，分离保护迷iE}1I 经，暴露一侧颈总动脉，向头侧分离至颈动脉分叉，并尽量向头侧分离并确认颈外碰ij： 和颈内动脉，在颈外动脉发出第一分支处将其结扎，然后用微动脉央暂时央闭颈总矗{{： 和颈内动脉，在颈外动脉结扎处将其煎断并反折，使颈外动脉残端与颈网动脉成一直线。 硬膜外导管后接压力换能器及动脉测压装置，压力换能器固定的高度与兔的心脏在ji· 水平，硬膜外导管以肝素液冲洗，经颈外动脉残端向颈内动脉缓缓置入(见图1)，彳王续 近入颅处旋转导管调整日口进方向，使导管前端弧度，更好的与血管走形相一致，退姐坝 内动脉上的动脉央后，用丝线将颈外动脉残端和硬膜外导管一同结扎，松紧以无血璐旋 出且能送入导管为宜，去掉动脉央继续插管，同时将颈总动脉上的动脉央打丌，协．复札 流，一边推进导管一边观察动脉压数值和波形，随血液流动继续缓慢推进硬膜外导雷， 直至有轻微阻力感同时动脉波形不规则直至消失(见图2，3)，且导管进入深度达／．(屺【^ 以上，说明导管Iii『端已达大脑中动脉，阻闭成功．记录此时『日J作为大脑中动脉阻c于j『蚝 时问，同时『日J断肝素液冲洗，达l小时后，抽出硬膜外导管恢复脑血流灌注，将劲㈨iJJ 脉残端结扎旷置，为防止切口感染，以庆大霉素液冲沈后逐层缝合颈部切口，术后2e· 小时内以O．9％尘理盐水20ml／kg静点以补充术前至术中所丢失体液，将兔放刚笼trj养， 亡动物即刻丌颅取脑寻找原因(有蛛网膜下腔出血者需重新造模补充实验例数)。 延边人学医学院帧Ij学位论文 村{：}’J有法 图l硬膜外导管经颈外动脉残端置入颈内动脉到达人脑中动脉 I圣|2娃小I卜村劫j诛Jh披彤披拊越甘昔瓜波彤逐渐，殳小舭则 幽3娃求导管栓褒动脉后正常迕续波形消失．幽中节段性波形为呼吸十扰波 ．8． 延边人学仄学院蝴l学佗论史 材料’j方j上 1．5线栓组模型制备 麻醉方法与手术步骤同上，参照文献。以选定之线栓用同法经颈外动脉残端括j＼颤 内动脉，达预定深度4．Ocm且感轻微阻力。即认为已到达并阻闭大脑中动脉，结扎线f{： 和颈外动脉残端，记录阻闭时『日J，达到预定时『丑J后，向外拉出线栓2．0cm，恢复艏fn旅 灌注。术后处置与观察指标与微导管组同。 1．6假手术组模型制备 实验组。以上过程均在室温恒定(24—2j℃)情况下进行，以利于评价脑缺血柙度。 逆边人学医学院坝I。学位论殳 她察持暑，． 观察指标 2．1神经行为学评分 侮术后24小时，由一不了解分组情况的观察者评估并记录抻经行为学评分，力浊 神经功能缺损，不能完全伸展一侧前爪：IIl级2分，中度局灶性神经功能缺损，矗f!!J 转匾：I、’级3分，重度局灶性神经助能缺损，向一侧倾倒：v级4分，不能自发行．E． 意识水平下降，与脑梗死相关的死亡。 2．2模型成功率及意外死亡率 2．3TTC染色测量脑梗面积和百分比 各组动物在大脑中动脉阻闭行脑缺血一再灌注后24小时，将动物在深麻醉状念一jj=：= 速取脑，将新鲜脑组织置于冰冷的生理盐水中浸泡(2—3℃)10分钟，去除绣球、，J、翰 和低位脑干后，再置于一80℃冰箱中快速冷冻3分钟，取出后将脑组织冠状切四_7：，切 成五片，第一刀在脑阿极与视交叉连线中点处；第二刀在视交叉部位；第三刀在漏斗b’j 部位：第四刀在漏斗柄与后叶尾极之I．日J。然后迅速将脑片置于5毫升含有舶TTCZ：： 脑