大黄鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白基因克隆表达及其基于a溶血素转运系统分泌展示.pdfVIP

1大黄鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白基因的克隆、表达及其 基于α-溶血素转运系统的分泌展示 杨朝，刘琴，马悦，王启要，张元兴 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海（200237 ） E-mail：yxzhang@ 摘 要：以大黄鱼虹彩病毒(Large Yellow Croaker Iridovirus, LYCIV)基因组DNA为模板，基 于已报道的虹彩病毒主要衣壳蛋白(major capsid protein, MCP ）基因开放阅读框两侧的保守 序列设计引物，通过PCR扩增得到大黄鱼虹彩病毒的主要衣壳蛋白编码基因mcp 。将mcp基 因克隆入表达载体pET-16b ，进行表达纯化，并制备多克隆抗体。同时，将大黄鱼虹彩病毒 mcp基因克隆到含有完整大肠杆菌α-溶血素分泌转运原件的分泌表达载体pMOhly1上，分别 以大肠杆菌和鳗弧菌减毒疫苗株为宿主尝试MCP蛋白的分泌表达。结果显示，基于大肠杆 菌α-溶血素分泌转运系统，虹彩病毒MCP在大肠杆菌能够得到很好的分泌表达，而在鳗