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奶粉中阪崎肠杆菌PCR和荧光PCR检测方法的研究-食品科学
※分析检验 食品科学 2006, Vol. 27, No. 09 203
奶粉中阪崎肠杆菌PCR和荧光PCR
检测方法的研究
1 2 3,
高 虹，张霞，高旗利 *
(1.天津大学化工学院制药工程系，天津 300072；
2.天津出入境检验检疫局，天津 300456)
摘 要：建立了奶粉中可致婴幼儿高死亡率的阪崎肠杆菌的PCR和荧光PCR检测方法。利用细菌16S和23S rDNA的
保守区设计通用引物，对6株阪崎肠杆菌16S-23S rDNA间区序列(ITS)进行扩增和测序，在比对阪崎肠杆菌ITS序列
的基础上，设计了11条PCR和荧光PCR检测引物，组合成30对PCR引物，并筛选出一对种特异性引物，建立了奶粉
中阪崎肠杆菌PCR和荧光PCR检测方法。用10株阪崎肠杆菌，18株近源菌株验证实验表明，本文所建立的PCR和荧
光PCR方法特异性强；加菌实验表明，奶粉样品中阪崎肠杆菌检测低限为(2.2～5.4)CFU/100g，灵敏度高；新建的
PCR和荧光PCR方法与FDA BAM( 美国食品及药品管理局微生物分析手册 )方法比对实验表明，三种方法的检测结
果完全一致。由于PCR和荧光PCR检测方法快速、可靠，因此可替代传统检验方法。
关键词：奶粉；阪崎肠杆菌；ITS；PCR ；荧光PCR
PCR and Real Time PCR Detection for Enterobacter sakazakii in Dehydrated Powdered Milk
1 2 2,
GAO Hong ，ZHANG Xia ，GAO Qi-li *
(1.SchoolofChemicalEngineering,TianjinUniversity, Tianjin 300072,China；
2.TianjinEntry-Exit InspectionandQuarantineBureau, Tianjin 300456,China)
Abstract ：Inthisarticle, thespecies-specificPCR andreal timePCRwere developedtodetectthe 16S～23SrDNA internal
transcribedspacer (ITS)ofE. sakazakii.Onepairof specificprimerswere designedby sequencingthe ITSof sixstrainsof
收稿日期：2005-09-26 *通讯作者
基金项目：科技部农社司资助项目(2003DIA6N002-02-01)
作者简介：高虹(1965-)，女，在站博士后，主要从事植物细胞信号传导及基因表达研究。
生免疫学结合，最后通过固相上的CL抗原-抗体-抗抗体酶 noassayforclenbuterol[J].Talanta,2000,52:311-318.
[2] 张清安, 范学辉. 动物性食品中盐酸克伦特罗(瘦肉精)残留危害及其
复合物中酶催化的显色反应检测CL抗原的含量。实验结
检测方法研究进展[J].食品与发酵
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