咖啡因的含量的测定毕业论文.doc

读万卷书 行万里路 PAGE 2011届攻读学士学位本科生毕业论文(设计) 测定氨咖黄敏片中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量 学 院 中 药 学 院 学生姓名 代勤高 专 业 中药资源与开发 实习单位 曲靖药业有限公司 导师姓名 余鹏飞（执业药师） 二零一一年五月十四日 测定氨咖黄敏片中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量 摘 要:其目的为用HPLC法对氨咖黄敏片中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量同时进行测定。其方法为采用Diamonisal C18（200mm×4.6mm，5um）色谱柱 ；以甲醇－水(40∶60)为流动相,流速为1.0mL/min, 柱温为室温，检测波长为216nm,进样体积为20μL等条件下进行测定。其结果为HPLC法测定表明，对乙酰氨基酚在0.3 mg/mL ~0.7 mg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999；平均回收率=99.92%。咖啡因在0.018 mg/mL ~0.042 mg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998；平均回收率=99.74%。其结论为高效液相色谱法（HPLC法）不仅能使对乙酰氨基酚和咖啡因更好地分离开来,提高了检测的专属性和准确度,而且操作简单迅速、结果准确可靠、重复性、稳定性良好，适用于氨咖黄敏片中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量测定。并且目前本法也被大多数制药企业应用于有效成分的分析与含量的测定。 关键词: 高效液相色谱法（HPLC法）；氨咖黄敏片；对乙酰氨基酚；咖啡因；测定含量； 引言 氨咖黄敏片是由对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏、人工牛黄制成的复方制剂。常用于感冒引起的鼻塞、头痛、咽喉痛、发热等症状，是一种有效实惠的常用感冒药。其处方中对乙酰氨基酚充当解热止痛药,被广泛应用于感冒药中[1]。咖啡因是一种甲基黄嘿吟，是中枢神经刺激剂。其药物学作用是影响大脑皮层、延髓和脊髓，刺激心肌，增加呼吸频率和深度，刺激肾上腺髓质释放肾上腺素，可兴奋大脑皮层,解除疲劳；并可使脑血管收缩,缓解脑血管扩张引起的头痛[2]等作用。在本品中起到主导的作用与功效，因此被确定为检测的对象。本品收载于国家药品标准[3]中。该标准中采用指示剂滴定法分别对对乙酰氨基酚和咖啡因的含量进行测定。其中对咖啡因含量采用加热回流提取后用外指示剂法滴定,操作繁琐，容易造成样品损失而使结果偏低；另外采用氯仿提取后滴定，毒性较大，挥发性强对实验工作者生命健康影响巨大；并且对滴定终点判断易受主观因素影响，测量误差较大[4-5]。而高效液相色谱法能很好的弥补这一些缺点和不足发挥他自己的优点。所以采用HPLC法同时对对乙酰氨基酚、咖啡因的含量进行测定。操作简便、快速、重现性良好，使其含量测定结果准确可靠更符合客观实际。[6-7] 1. 实验材料 1.1 实验仪器 岛津高效液相色谱仪LC－10ATVP泵； SIL－HTA自动进样器；SPD－M10AVP检测器；CLASS－VP色谱工作站；安捷伦1100高效液相色谱仪；BS－210S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；HH.S－112型电热恒温水浴锅（江苏省医疗器械厂）；KQ－5 0 B型超声仪 ( 昆山市超声仪器有限公司) ；滴定管等。 1.2 实验试剂 甲醇为色谱纯（重庆川东化工有限公司 化学试剂厂），稀硫酸（重庆川东化工有限公司 化学试剂厂），稀盐酸（成都市欣海兴化工试剂厂），水为重蒸馏水，氯仿，硫代硫酸钠滴定液，亚硝酸钠滴定液等。 1.3 实验药品 对乙酰氨基酚对照品和咖啡因对照品均由中国药品生物制品检定所提供。氨咖黄敏片（批号：051102、051107、051109、051110）由云南曲靖药业有限公司提供。　 2. 实验条件（色谱条件）　 色谱柱：Diamonisal C18（200mm×4.6mm，5um）色谱柱；流动相：甲醇－水(40:60)，流速为1.0mL/min，进样体积为20μL，柱温为室温，检测波长为216nm。理论板数按对乙酰氨基酚峰计不少于5000，对乙酰氨基酚与咖啡因的分离度大于4。并在计算机上设置好各项参数。 3. 溶液配制 3.1 对照品溶液的制备　 精密称定105℃干燥至恒重的咖啡因对照品30mg，精密加乙醇50mL使溶解，精密量取5mL，置50mL量瓶中并精密加入105℃干燥至恒重的对乙酰氨基酚对照品50mg使溶解，加水稀释至刻度，即得浓度为每mL含对乙酰氨基酚1mg和咖啡因0.06mg的对照品贮备液。精密吸取上述溶液5mL置10mL量瓶中，加重蒸馏水稀释至刻度，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过，作为对照品溶液。 3.2 供试品溶液的制备　 取氨咖黄敏片20片，研细，精密称取适量(约相当于对乙酰氨基酚200mg量)，置于25mL锥形瓶瓶中，