《检验仪器维修与使用》流式细胞分析.pptVIP

第十章 流式细胞分析 主讲：周振华 第一节 流式细胞分析理论知识 什么是流式细胞仪 关键是制备：单细胞悬液。 流式细胞的检测步骤 1、单细胞悬液 2、对测量细胞间隙荧光标记染色 3、流式细胞测量 4、对测量结果进行定量分析 5、对测量结果进行生物医学意义解释 可测量的参数 分为：结构参数和功能参数 1、结构参数：细胞大小、形态、细胞核与细胞质的比值，色素颗粒，亚细胞形态，DNA，RNA，蛋白质含量，细胞表面抗原，碱性蛋白，染色体结构。 2、功能参数：氧化还原酶状态，表面电荷，pH值，膜电位，酶活性，DNA合成能力，膜的流动性，细胞受体，线粒体膜电位，细胞浆和膜的钙离子活性。 影响因素 1、荧光染色 2、激光光源的稳定性 3、细胞流速的稳定性 4、细胞悬液样品的影响 第二节 仪器检测原理 分类： 流式细胞仪根据功能不同可分为临床型和科研型。 临床型只有分析功能，没有分选功能，操作简便，易学易掌握。 科研型既有分析功能又有分选功能，可快速将所感兴趣的细胞分选出来。 流式细胞仪的分类 流式细胞仪根据其结构不同又可分为一般流式细胞仪和狭缝扫描流式细胞仪。 前者的光斑直径大于被检细胞体积，只能提供细胞内某种生物化学成分的参数。 狭缝扫描流式细胞仪 由样本和鞘液组成 待测细胞 单个细胞的悬液 荧光染料标记的单抗对其染色 受清洁气体压力 从样品管进入流动室形