沙氏葡萄糖琼脂培养基念珠菌显色培养基.PPTVIP

白色念珠菌 简介 白色念珠菌的典型特征 显微镜下特征 白色念珠菌菌落形态 鉴定依据 检查步骤 白色念珠菌与酵母菌的鉴别 白色念珠菌的典型特征 白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形，直径为3~6µm，革兰染色为阳性，但菌体着色不均匀，以出牙方式繁殖，在适宜的培养基上出芽生孢子及假菌丝生长，在假菌丝间其末端形成厚膜孢子。 白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶，可分解NGL，使对-硝基苯酚游离，在碱性条件下显色。 2019-1-2 显微镜下特征 2019-1-2 2019-1-2 白色假丝酵母菌的镜下形态（假菌丝） 2019-1-2 白色假丝酵母菌的镜下形态（厚膜孢子） 2019-1-2 白色假丝酵母菌的镜下形态（芽管） 2019-1-2 白色假丝酵母在血平板的镜下形态（芽管） 白色念珠菌菌落形态 培养基 菌落形态 沙氏琼脂培养基 乳白色偶见谈黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变浓，质地变硬或有皱褶。 吐温80-玉米琼脂培养基 灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变浓，质地变硬或有皱褶。 血平板 呈灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变浓，质地变硬或有皱褶。 TTC 呈乳白色或淡红色，菌落小 2019-1-2 念珠菌在显色培养基上的菌落颜色 念珠菌 菌落颜色 白色念珠菌 绿色，翠绿色（直径约2nm） 热带念珠菌 蓝色，铁蓝色（直径约1.5nm) 克柔念珠菌 粉红色（直径约4.5nm） 光滑念珠菌 紫色（直径约2nm) 其他念珠菌 白色（直径不定） 2019-1-2 2019-1-2 白色假丝酵母菌在显色培养基上的颜色和菌落形态 2019-1-2 鉴定依据 1、菌落特征 2、显色培养基反应 3、厚膜孢子形成 假菌丝末端或侧缘形成典型的厚膜孢子 4、芽管形成 有孢子长出短小芽管 5、生化试验 6、注意与其他常见念珠菌和酵母菌的鉴别。 检查步骤 增菌 分离培养 初步判断 芽管试验 结果判断 2019-1-2 增菌 白色念珠菌（Candida albicans） 取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、10cm2）直接或处理后接种至适量（不少于100ml）的沙氏葡萄糖肉汤培养基中，培养48～72 小时。 分离培养 取上述培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，培养24～48 小时（必要时延长至72 小时）。 初步判断 未检出 无菌生长 与其菌落形态特征不符的 与其菌落形态特征相符或疑似 挑选2～3个菌落 念珠菌显色培养基平板 无绿色或翠绿色的菌落生长 菌落为绿色或翠绿色 未检出 1%吐温80-玉米琼脂培养基 培养物进行染色，镜检及芽管试验 挑选2～3个菌落 24～48h 24～48h 2019-1-2 芽管试验 挑取1%吐温80-玉米琼脂培养基上的培养物，接种于加有一滴血清的载玻片上，盖上盖玻片，置湿润的平皿内，置35～37℃、1～3 小时，置显微镜下观察，可见到由孢子长出短小芽管。 若上述疑似菌为非革兰阳性菌，显微镜未见厚膜孢子、假菌丝、芽管，判供试品未检出白色念珠菌。 2019-1-2 结果判断 供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。 2019-1-2 沙氏葡萄糖液体培养基 用途：用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测、真菌的培养 葡萄糖 40g 水 1000ml 蛋白胨 10g 除葡萄糖外。取上述成分，混合，微温溶解，滤过。加入葡萄糖，溶解，分装，灭菌。 2019-1-2 沙氏葡萄糖琼脂培养基 用途：用于真菌的分离培养 葡萄糖 40g 琼脂 15～18g 蛋白胨 10g 水 1000ml 除琼脂和葡萄糖外。混合，微温溶解，滤过。加入琼脂和葡萄糖，溶解，分装，灭菌。 原理： 蛋白胨提供氮源，维生素，生长因子；葡萄糖提供碳源；琼脂是凝固剂。 沙氏葡萄糖琼脂培养基 2019-1-2 念珠菌显色培养基(CHROMagar) 蛋白胨 10.2g 琼脂 15g 氯霉素 0.5g 灭菌水 1000ml 色素 22.0g 除琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH 值至6.3±0.2。滤过，加入琼脂，加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解，倾注平皿。 念珠菌显色培养基(CHROMagar) 念珠菌显色培养基根据酶底物法，白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶，可分解NGL，使对-硝基苯酚游离，在碱性条件下显色。 2019-1-2 1%吐温80-玉米琼脂培养基 黄色玉米粉 40g 琼脂 10～15g 聚山梨酯80 10ml 水 1000ml 取玉米粉、吐温80 及蒸馏水500ml, 混合，65℃加热30 分钟,混匀，用纱布滤过,补足原水量。取琼脂，水500ml, 混合，加