固定化分选酶介导的多肽环化Enzymaticcyclizationofpeptidesusing.PDFVIP

药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 15, 50 (5): 627 632 ·627 · 定化分选酶介导的多肽环化 张书香, 刘忞之, 杨 燕, 程克棣, 孔建强, 王 伟* ( 中国医学科学院、北京协和医学院 物研究所, 天然药物活性物质与功能国家重点实验室, 国家卫生和计划生育委员会天然药物生物合成重点实验室, 北京 100050) 摘要: 多肽环化修饰是提高其稳定性和生物活性的重要手段之一, 本研究建立了含有适于亲和色谱纯化的6 个组氨酸和几丁质结合域两个融合标签的分选酶表达系统, 纯化获得了目的蛋白; 酶 动力学实验结果表明融 合标签对其催化活性没有影响; 以N-端含有3 个甘氨酸和C-端含有分选酶识别序列的线性肽为底物研究了固定 化酶催化线性肽的环化, 该技术操作简单, 易于酶 反应产物的分离纯化和固定化酶再利用, 可直接用于环肽类 药物的化学 酶法合成。 关键词: 分选酶; 固定化酶; 环肽; 环化 中图分类号: R93 1 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 15) 05-0627-06 Enzymatic cyclization of peptides using immobilized sortase A * ZHANG Shu-xiang, LIU Min-zhi, YANG Yan, CHENG Ke-di, KONG Jian-qiang, WANG Wei (State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines and Key Laboratory of Biosynthesis of Natural Products of National Health and Family Planning Commission, Institute of Materia Medica, Chinese Ac ademy of Medica l Sciences Peking Union Medical College, Beij ing 100050, China ) Abstract : Peptide cyclization, a pivotal approach to modifying linear precursors of proteins and peptides, has been used to enhance their biological activities and serum stabilities. Recently, sortase A (SrtA) from Stap hyloccus aureus becomes a promising new technology for efficiently incorporating site specific modifications into proteins, conj ugating the cell surface and cyclizing the linear peptides. In this study, we