杉木优良无性系组快繁技术研究.docVIP

PAGE PAGE 9 杉木优良无性系组培快繁技术研究 摘 要 本文报道从福建洋口国有林场等地营建的杉木杂交子代测得林、无性系测定林中选择出速生、高红心以及耐瘠薄立地等不同育种目标优良无性系36个，并对其进行组培快繁试验。经过详尽深入的实验分析，制定出一整套对应于杉木的组培快繁技术。 关键词 优良无性系 组培快繁 诱导 生根 Abstract: A mature Mass propagation is one of the emergency needs for clonal forestry. The author presented results of a series of mass propagation systems for 36 clones. All of the clones were selected upon red-heart and barren tolerance among early hybridization and drought tolerance experiments on Yangkou Forest Form, Fujian, China. From in-depth experiment and analysis, we have framed a technology for clone fir. Key words: Superior clones; Tissue Culture; Abduction; Rootage 组织培养作为20世纪发展起来的现代生物技术，是无性繁殖中最重要的技术手段之一。其主要优点是能够在短期内大量繁殖遗传基因型比较一致的优良材料，而且能充分利用繁殖材料的遗传潜能，达到最佳的效益水平，同时苗木的生产可以在室内进行，降低自然环境条件的不良影响，全年生产组培苗木。 1 试验材料 从福建省洋口国有林场、邵武卫闽国有林场、省来舟国有林业试验场、平和国强国有林场等地营建的杉木杂交子代测定林、无性系测定林中，按速生、高红心、耐立地瘠薄等不同选种目标选出优良无性系36个作为试验材料。 2 试验方法 2.1 外植体表面灭菌 外植体采集回来后，剪去全部针叶，然后剪切成2.0 cm左右的带芽茎段，用洗洁精或洗衣粉漂洗5 min，流水冲洗2～3个小时，在超净台上用75％酒精和0.1％HgCl2或0.05％HgCl2进行灭菌，分别对灭菌时间、灭菌液浓度、重复灭菌次数等3个因子进行试验。 2.2 诱导培养及培养基优化 对外植体进行表面灭菌后，将其接入不同的诱导培养基中进行腋芽诱导培养。基本培养基采用1/2MS，蔗糖3％，添加不同浓度的6-BA（0.1，0.3， 0.8，1.4，2.0）进行单因子试验，共5个处理，每处理接种50个外植体，进行重复试验，同时，进行光照培养和暗培养试验（接种后在黑暗中培养15 d以后再转入光照培养）。根据试验结果继续对诱导培养基进行调节优化，按统一标准，各处理培养40 d后统计其出芽率（发生芽的外植体占无菌外植体总数的百分率），出芽指数（发生芽的外植体上的平均出芽数），以及芽均高（全部芽长的总和除以芽总数）。 2.3 继代增殖培养及培养基优化 初代培养40～50 d后，新芽长为2 cm以上时，即可将其转入继代培养基中。基本培养基采用1/2MS，蔗糖3％，添加不同浓度的6-BA（0.3，0.5，0.7，0.9，1.2）和不同浓度的IBA（0.1，0.3，0.5）进行试验，共12个处理，每处理接种10瓶，每瓶接种2个新芽，各处理间接种的新芽要基本保持一致以便减少试验误差。继代培养5代后统计各处理的继代增殖倍数（丛生芽总数/20/继代次数）及每个处理的有效苗数（高2 cm以上生长健壮的芽总数），根据试验结果继续对培养基进行调节优化，同时，对不同无性系进行试验。 2.4 壮苗培养及培养基优化 继代培养40d以后，剪切继代苗中2cm以上的生长健壮芽接入添加不同浓度IBA（0.1～1.0）和IAA（0.1～0.5）MS培养基中，蔗糖3％，共10个处理，试验重复3次，各处理在培养30 d后进行调查统计，根据试验结果将壮苗培养基进行调节优化。 2.5 生根培养及培养基优化 以继代增殖苗或经过壮苗培养中2cm以上的有效苗为材料进行生根试验。基本培养基采用1/2 MS，蔗糖1.5％，分别添加不同浓度的NAA（0.1，0.5，1.0）、IBA（0.1、0.5、1.0）、IAA（0.1、0.5、1.0）和ABT1#（0.1，0.5，1.0）进行单因素试验，各处理培养30 d后调查统计生根率、平均根长、平均根条数、生根时间(转入生根培养基到开始出根的天数)及苗的生长情况。根据单因素试验结果得出的信息，继续对生根培养基进