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食品检测论文：芯片技术及食品检测透析 　　本文作者：张 娟 谭嘉力 梁宇斌 李晓明 吴炜亮 工作单位：广东产品质量监督检验研究院国家食品安全风险评估与质量监督检验中心 　　可视基因芯片技术在食品安全检测中的应用 　　在食源性致病微生物检测中的应用食源性致病微生物检测是食品安全检测中一个重要的环节。食源性致病微生物对食品的污染，不仅会给国家造成巨大的经济损失，而且还会严重威胁人类的生命安全。目前传统的食源性致病微生物的检测方法由于过程繁琐，而且各操作步骤之间相对独立，因此很难快速且高通量的对食品安全进行检测。因此，非常有必要建立全新的食源性致病微生物检测体系。可视芯片技术从理论上说与传统生物芯片的检测效果是一致的，可以一次性检出所有潜在的致病微生物，同时兼具传统生物芯片的所有优点，因而在食源性致病微生物检测中具有很好的发展前景。近年来，许多学者对可视芯片检测食品中常见致病微生物进行了一系列相关探讨和研究。朱许强等运用可视基因芯片技术快速、准确检测食品中肠出血性大肠埃希菌、志贺菌、沙门菌以及单核细胞增生李斯特菌4种常见产毒微生物；以志贺菌为对象，该方法的检测灵敏度可达到670cfu/mL[19]。赵金毅等[20]利用该技术可以准确的检出沙门氏菌属和金黄色葡萄球菌、小肠结核肠炎耶尔森氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌3种食品中常见致病菌，对于汤卜逊沙门氏菌，检测灵敏度可达×101cfu/mL。Jenison等[21]则开发出一套多呼吸道病毒识别的可视基因芯片，可准确识别6种人类呼吸道病毒，且敏感性高、通量大、结果直观。但以上研究方法存在明显的不足，即未充分体现芯片高通量检测这一特点，因而相关学者又做了进一步研究以弥补该不足。Bai等和黎吴雁等[22-23]分别针对11种和12种常见食源性致病菌建立了相应的诊断方法,后者针对纯培养单增李斯特氏菌的灵敏度为103cfu/mL，模拟样本的灵敏度为104cfu/mL。与以上检测方法建立的原理不同，部分研究人员建立了另一类可视基因芯片。郭永刚等以链霉亲和素包被的磁珠作为标记物，通过链霉亲和素与生物素的亲和作用，使得杂交结果可以在普通的光学显微镜或放大镜下检测，甚至肉眼可见，并利用大肠杆菌作为样品进行方法验证，取得较好的实验结果[24]。史蕾等[25]利用基于磁珠的可视化基因芯片建立了一种快速检测诺如病毒的新方法，检测的灵敏度达50ng，特异性和重复性均较好，与PCR方法检测结果一致。Sun等[26]同样基于磁珠法建立了用于检测7种肠道病原菌的可视基因芯片技术，检测灵敏度高于前者，86个样品同时用传统方法、PCR法和芯片方法进行检测，三者检测结果完全一致。同样是对肠道致病菌的检测，彭贤慧等[27]基于酪胺信号放大技术和金标银染技术建立的可视化基因芯片法可同时检测10种肠道病毒，可检出不低于102拷贝/μL的体外转录RNA，30例临床样本的芯片检测结果与荧光PCR法一致。此外，有关研究人员基于不同基质也做了相关研究。Wang等[28]利用尼龙膜作为基质建立了可检测20种肠道病原菌的可视芯片检测方法，检测结果通过特异性PCR进一步得到证实。张英朗等[29]同样利用尼龙膜做基质结合反向斑点杂交技术制备了可视化的基因芯片，能够在3~4h对我国常见的12种角膜致病真菌进行鉴定，特异性和敏感性较高。可视蛋白芯片的研究较少，石霖等将免疫胶体金技术和银显影技术有机的结合，建立并优化了可同时鉴别诊断4种禽病血清抗体的可视化蛋白质芯片技术[30]。从以上可以看出，可视基因芯片在食源性致病微生物的检测应用方面比可视蛋白质芯片技术应用更加广泛，其主要原因是前者相对与后者在技术成熟度、稳定性、操作程序方面均占据一定的优势。可视芯片技术在食源性致病微生物检测方面的特点及优势，可能使其在未来成为最具潜力的检测手段之一。在转基因食品检测和真假植物油鉴别中的应用伴随着现代生物技术的迅猛发展，以基因工程为基础的转基因技术得到广泛应用，因此，越来越多的转基因食品展现在人们面前。一方面由于对转基因食品可能对人体以及生物多样性导致的不可预期的结果所担忧，另一方面为了维护消费者对转基因食品的知情权和选择权以便做出综合评价，转基因检测技术的研究已成为当前生物技术领域的热点。现有的检测方法一次只能检测一种外源基因，对具有多种特性的转基因食品却无能为力，而且其检测效率低、检测周期长，因而不能实现对食品中大量不同转基因成分的高通量检测。Bai等[31]利用可视基因芯片技术对转基因作物进行了相关研究。通过对转基因作物的特异性序列及植物基因组SNP检测的研究，建立了一套基于可视基因芯片技术的转基因作物检测和植物基因组SNP突变鉴别的行之有效的方法。该方法快速准确，并显示出高灵敏度和强特异性，可广泛运用于需要对特异核苷酸序列进行阳性鉴定的相关研究中。Xu等和