临床医学实验室管理之检验中的质量控制.pptVIP

（3）常见失控的主要原因 （4）室内质控的注意事项 3. 室内质控结果失控的判读 （三）PCR实验室日常工作的注意事项 核酸提取过程的注意事项 *全自动荧光定量PCR仪的普及使用大大减少了污染的发生，增加了检测结果的可信性。但污染的情况仍可能发生，一旦发生，应积极寻找污染原因，包括试剂污染和实验室污染，及时处理。对全自动荧光定量PCR仪要定期维护与保养，以保证仪器处于最佳工作状态。 案例分析四 1.PCR污染的发现：2012年5月12日，我PCR实验室按正常的操作规程检测HBV-DNA标本，同时设立了阴性对照和阳性对照(试剂盒中配备+实验室自制阳性质控品)，扩增结束分析结果时，发现HBV DNA所有的标本及阴、阳性对照均为阳性，提示操作过程中出现污染，但具体是什么原因引起的污染还不清楚。 2.污染源的追踪：出现污染后，我们首先考虑可能是试剂的污染，更换新批号的HBV试剂重新检测后，结果仍为全部标本阳性。 将HBV标本拿到其他正规的PCR实验室检测，结果标本中阴、阳性结果都有，阴性对照是阴性，阳性对照是阳性，说明标本没有被污染将两种批号的HBV试剂拿到其他正规的PCR实验室检测，也显示试剂没有问题。 我实验室用消毒液擦拭工作台面后，打开所有的紫外灯照射一天，将所使用微量进样器、离心管、枪头、手套、记号笔、记录本等都更换掉，再将HBV标本进行检测，结果全部标本仍然为阳性。 用消毒液擦拭工作台面后，打开所有的紫外灯照射一天，将HBV标本重新检测，同时设置了两个阴性对照(A和B)，A 阴性对照为将试剂的反应管从试剂盒中拿，打开反应管的盖子，在空气中暴露10 min，盖上盖子，上机检测；B阴性对照为将试剂的反应管从试剂盒中拿出，不开盖子，直接上机检测。结果是全部标本和A阴性对照为阳性，而B阴性对照为阴性。 至此，虽然还查找不到污染源是什么，但有一点可以肯定，PCR实验室污染是气溶胶扩散而引起的后来经过调查，发现污染是由于本室一位工作人员在打扫实验室卫生时，用扩增区的扫笤和拖把打扫了标本制备区的卫生引起。 3. 污染的排除： 在确定了污染的原因后，我们就开始着手排除污染，每天都打开整个PCR 实验室的门窗和排气扇，让整个实验室通风，用消毒液擦拭整个PCR实验室，打开所有的紫外灯照射。 每隔3天按上述步骤检测一次，一直这样处理了一个月，A阴性对照才转为阴性。连续检测三次A和B阴性对照，每次结果都均为阴性，才确定PCR实验室恢复正常。 通常我们对PCR实验室污染的预防是采取隔离不同操作区、分装试剂、改进实验操作等规则，对污染的处理是用稀盐酸擦拭或浸泡；紫外线照射法等。而对于实验室的通风方面没有给予足够的重视，为了防止实验区间之间的相互污染，各个实验区间都是尽可能的密闭，从而使得实验室出现PCR产物残留污染的几率增大。从本次PCR实验室污染排除的过程来看，污染得以排除的一个关键是通风。适当的给予实验室通风，可起到空气稀释的作用，有利于PCR产物残留量的减少，加快实验室污染的排除。 八、POCT检验领域的质控应用分析 “即时检验”或“床旁检验” 按应用范围分为医院内POCT(分布在急诊化验室，ICU病房和分科门诊等部分)和医院外POCT（诊所，救护车和家庭）。POCT的应用为院前急救、院内快速诊断、ICU病房或手术室，紧急救灾的现场以及环保监测等提供更新、更快、更准确、更方便的参考，但由于是分散检测，若操作不够规范和质量控制把握不好，检验结果的准确性将大受影响。 室内质量控制：POCT操作人员必须按照下述要求认真做好日常质量控制、填写相关质量控制记录，供POCT管理委员会检查和备案：①仪器的校准和使用保养记录；②室内质控记录，使用无内部质控装置的检验系统，质控品检测每二日不少于一次；使用有内部质控装置的检验系统，质控品检测每周不少于一次。 结果比对：每个POCT项目均应与检验科的检测进行比对，时间为每半年至少进行1次，具体比对方法由检验科负责培训。 第三节 实验室间比对 一、什么是实验室间比对 二、无室间质量评价计划的替代方案 三、实验室间比对样品的检测 四、实验室间比对结果的分析 五、检验结果可比性的控制及对临床活动的影响 1.什么是实验室间比对？它的作用有哪些？应用形式有几种？ 2.无法进行室间质评项目的替代方案是什么？适用于有哪些项目？ 3.实验室间比对流程 及结果计算？ 4.各专业实验室间比对的主要特点？ 一.实验室间比对的定义 是指按照预先规定的条件，由两个或多个实验室，对相同或类似样品进行检测的组织、实施和评价活动。利用实验室间的比对，对实验室的校准或检测能力进行判定称为能力验证（proficiency testing，PT）或室间质量评价 （extern