基于GC-MS的代谢组学方法筛选辐射生物剂量血浆标志物的初步研究-放射医学专业论文.docxVIP

基于 GC-MS 的代谢组学方法筛选辐射生物剂量血浆标志物的研究 中文摘要 中文摘要 核战争和灾难性核事故的发生会造成大量伤员，在对此类伤员的紧急医学救 治中，早期、快速检测伤员受照剂量的大小，是合理利用有限医疗资源，科学制 定救治策略，提高救治效率和存活率的关键环节。本文探索性地运用基于气相色 谱-质谱联用（GC-MS）的代谢组学方法，筛选出潜在的辐射生物剂量标志物，并 将其用于辐射伤情分类的研究。此外，对这些代谢标志物的生物学意义以及关键 代谢通路进行了初步探讨。本研究为发展快速、简便、灵敏和准确的电离辐射生 物剂量计以及揭示急性电离辐射损伤和修复的分子机制提供了实验依据。 1. 建立了基于 GC-MS 联用技术的血浆代谢物分析方法。以 N-O-双（三甲硅 基）三氟乙酰胺（MSTFA）-两步衍生法为基础，对样品制备方法（如萃取剂的选 择、萃取剂用量、衍生化条件）和 GC-MS 分析条件（如升温程序条件）进行了优 化。此外，对包括精密度、重现性及稳定性在内的分析方法特性进行了考察。在 此基础上，将 NIST 质谱数据库搜索和标准品验证相结合完成对血浆代谢物的结构 鉴定。 2. 利用建立的 GC-MS 血浆代谢物分析方法，从剂量效应（0Gy，2Gy，4Gy， 6Gy，8Gy）考察了不同时间点（辐射后 5h，24h，48h 和 72h）电离辐射对大鼠血 浆代谢物的影响，进行辐射损伤伤情分类的研究并筛选出潜在的辐射生物剂量标 志物，辐射生物剂量血浆标志物的筛选是利用遗传算法与随机森林相结合。结果 表明，辐射后 5 h、 48h 及 72h 的伤情分类均为 100%，24h 除轻度伤情分类为 92% 外，其余均为 100%。 3. 将不同时相点筛选的生物标志物进行相关性分析，探讨其生物学意义以及 涉及的关键代谢通路，辐射损伤所扰动的代谢通路主要包括氨基酸代谢、能量代 谢及脂类代谢。 关键词：电离辐射；代谢组学；气象色谱-质谱联用；辐射生物剂量标志物； 伤情分类 作 者：张圆圆 指导教师：王 畅 I 英文摘要 基于 GC-MS 的代谢组学方法筛选辐射生物剂量血浆标志物的研究 Preliminary study of the radiation biological dose estimation plasma markers based on GC-MS metabolomics Abstract Rapid radiation injury early triage after a radiological or nuclear exposure is vital for treatment of a large number of wounded people and limited medical resources allocation，it is critical for improving the treatment and survival efficiency. Here，a metabolomic methods based on gas chromatography-mass spectrometer（GC-MS）was developed for the analysis of plasma metabolic phenotype changes in rat body exploratory and select the potential radiation biomarkers. Finally，the radiation injury triage was studied combined with non-linear kernel partial least squares（KPLS）. In addition, the biological significance and relevant metabolic pathways of these biomarkers were explored. The findings provide experimental evidence for developing fast, simple, sensitive and accurate radiation biodosimetry and understanding the pathogenesis of radiation injury and repair. A GC-MS method was developed to analyze plasma metabolites. Based on the two step derivative of MSTFA, the s