人类传染病概述.DOC

《显微世界的奥秘》课程讲义 PAGE \* MERGEFORMAT 3 PAGE \* MERGEFORMAT 3 第四讲 真菌世界 实验一：用高倍显微镜观察霉菌和酵母菌 【实验目标】 1.练习使用显微镜，掌握高倍显微镜的使用方法。? 2.观察霉菌的形态? 【材料用具】发霉的橙子、发霉的干花、酵母菌培养液 【实验原理】 曲霉 营养菌丝具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端膨大成球状顶囊，表面辐射出一层或两层小梗，小梗上着生成串的球形分生孢子。分生孢子梗生于足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连。 根霉 菌丝无隔、多核、分枝状，有匍匐菌丝和假根。在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗，其顶端膨大成球形孢子囊。囊的基部有囊托，中间有球形或半球形囊轴。囊内产大量孢囊孢子。 毛霉 菌丝无隔、多核、分枝状，无假根或匍匐菌丝。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。各分枝顶端着生球形孢子囊，无囊托。? 青霉 菌丝有横隔，分生孢子梗亦有横隔，光滑或粗糙。基部无足细胞，顶端不形成膨大的顶囊，其分生孢子梗经过多次分枝，产生几轮对 称或不对称的小梗，形如扫帚，称为帚状体，小梗顶端有孢子。 霉菌是形成分枝菌丝的真菌的 霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称。不是分类学的名词统称，意即 “发霉的真菌”。 霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基生菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段后分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。由于实验室条件和时间有限，没有进行霉菌接种培养观察，直接选取生活中常见的材料直接观察。对制片要求比较高。 【方法步骤】 用镊子沿菌丝基部小心夹取少量菌丝放于载玻片上 不加清水，直接盖上盖玻片后观察。 实验二 应用血细胞计数板对酵母菌进行计数 【实验目标】? 1．通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化 2．学会使用血细胞计数板进行计数。 【实验原理】? 血球计数板，又名血细胞计数板，被用以对人体内红、白血球进行显微计数之用，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，是一种常见的生物学工具。血球计数板用优质厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用 HYPERLINK /item/%E7%9B%96%E7%8E%BB%E7%89%87 \t _blank 盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。计数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大方格，每个大格面积为1.0毫米X1.0毫米=1.0平方毫米;容积为1.0平方毫米X0.1毫米=0.1立方毫米。其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域（图中浅红色区域），每个中方格用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域（图中浅蓝色区域），每个大方格用单线划分为16个中方格。 计算公式：1mL培养液中酵母菌数量=平均每中格酵母细胞数×25×104×稀释倍数 80小格内酵母细胞个数／80×400×104×稀释倍数 【材料器具】? 滴管、试管、血球计数板、酵母菌培养液、蒸馏水 【实验过程】? 1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。 2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。 3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的 HYPERLINK /item/%E8%A1%A8%E9%9D%A2%E5%BC%A0%E5%8A%9B \t _blank 表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。 4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的 HYPERLINK /item/%E6%8A%98%E5%85%89%E7%8E%87 \t _blank 折光率相近，观察时应减弱光照的强度。 5．计数时若计数区是由16个中方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即100小格）的菌数。如果是25个中方格组成的计数区，除数上述四个中方格外，还需数中央1个中方格的菌数（即80个小格）。为了保证计数的准确性，避免重复计数和漏记，在计数时，对 HYPERLINK /item/%E6%B2%89%E9%99%8D \t _blank 沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方