凡纳滨对虾肠道内产消化酶益生菌的分离与筛选-水产学报.PDF

第 40 卷 第 4 期 水 产 学 报 Vol. 40, No. 4 2016 年 4 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Apr., 2016 文章编号: 1000–0615(2016)04–0537–10 DOI: 10.11964/jfc.20150309745 凡纳滨对虾肠道内产消化酶益生菌的分离与筛选 1 1 * 1 1 2 1，2 窦春萌 ， 左志晗 ， 刘逸尘 ， 张亦陈 ， 耿绪云 ， 孙金生 (1. 天津师范大学生命科学学院，天津市动植物抗性重点实验室，天津 300387 ； 2. 天津市水生动物市场疫病预防控制中心，天津 300221) 摘要：为获得具有消化酶活性且安全的益生菌，从凡纳滨对虾肠道中初步分离得到 576株细菌，对菌株进行产蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶能力的定性及定量测试，筛选出产 酶种类多且产酶能力强的菌株11株。对筛选出的11株菌进行了幼虾浸浴实验、药敏性实 验和溶血性实验，以评价其生物安全性。将11株菌的菌悬液添加到凡纳滨对虾幼虾的养 殖水体中进行浸浴实验，浸浴结束后用鳗弧菌进行刺激，测定不同浸浴组幼虾相关免疫 基因的相对表达量，以确定其对幼虾的保护效果。综合消化酶活性、菌株对幼虾的保护 效果及生物安全性，筛选得到4株效果较好的菌株。菌株的16S rDNA 分子鉴定结果表 明，细菌1号、2 号和4 号分别与芽孢杆菌(Bacillus sp. PCSAS2-38 ，GQ284495.1)、蜡样芽 孢杆菌(B. cereus strain N419 ，JN400121.1) 及苏云金芽孢杆菌(B. thuringiensis strain EA26.1 ，KC758847.1) 的相似性均为100%，9号菌株与荚膜红细菌(Rhodobacter capsulatus strain PSB-03 ，FJ866782.1)相似性达到99% ，为后续益生菌制剂的开发奠定了前期基础。 关键词：凡纳滨对虾；益生菌；肠道；鉴定 中图分类号：S 917.1 文献标志码：A 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei )原产于太 加剂即益生菌添加到饲料中，通过改善肠道菌 [4] 平洋东部沿岸水域秘鲁北部至墨西哥桑诺拉一 群平衡而对动物产生有益影响 。益生菌在动物 带，1988年由张伟权教授引进中国，1994年批量 体内既不会产生残留也不会出现耐药性，益生 育苗成功。由于其在盐度上具有广适性，在许 菌替代抗生素已经成为研究热点。这也引起了 多内陆地区也试养成功，从而在我国的水产养 国内外水产学家的普遍关注，掀起了益生菌在 殖产业中占有很大的比重，是目前水产养殖的 水产养殖中应用研究的热潮，并有望替代抗生