实验性兔主动脉粥样硬化易损斑块模型建立及评价.pdfVIP

实验性兔主动脉粥样硬化易损斑块模型的 建立及评价1 1 2 2 2 2 2 2 2 张军平 ，彭立 ，李良军 ，李明 ，许颖智 ，杨萃 ，周亚男 ，张光银 1 天津中医药大学第一附属医院，天津（300193 ） 2 天津中医药大学，天津（300193 ） E-mail: ppeng465@ 摘 要：目的：探索建立实验性兔主动脉粥样硬化易损斑块模型的新方法。方法：24 只雄 性日本大耳白家兔随机分为对照组8 只，实验组 16 只，对照组给予普通饲料，实验组给予 高胆固醇饲料、注射牛血清白蛋白及行球囊拉伤术，分别于0 周、3 周、6 周、10 周检测血 脂、ox-LDL、TNF-α、IL-1 、IL-10 ，实验结束时取腹主动脉进行病理形态学分析及NF-κBp65 亚基免疫组化染色分析。结果：实验组斑块内膜面积比为53.6% ，脂核面积与斑块面积比为 54.9% ，斑块纤维帽厚度与内膜中膜厚度（IMT ）比约为8.5%，除甘油三酯变化不大外，实 验组TC 、LDL-C 、HDL-C 、 LDL-C/ HDL-C 、TC/ HDL-C 、ox-LDL 、TNF-α、IL-1 、IL-10 均有明显升高趋势，在3 周、6 周、10 周时与对照组比较差异有统计学意义，且NF-κBp65 亚基阳性染色面积较对照组高 13.5 倍。结论：高脂喂养、免疫损伤加球囊拉伤可以成功建 立家兔主动脉粥样硬化易损斑块模型。 关键词：易损斑块；模型；球囊拉伤；牛血清白蛋白 中图分类号：Q95-33 1. 引言 动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)稳定斑块向易损斑块(vulnerable plaque，VP) 发展，并继而破裂导致血栓形成，是导致急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome，ACS) 发病的主要病理学基础。近年来，易损斑块的研究成为心血管病领域研究的热点，而实验动 [1] 物模型的建立是关键性问题，国内外不少学者做了相关探索，如小鼠ApoE 基因敲除模型 、 家兔内置球囊模型[2] [3] [4] 、家兔基因转染模型 、猪遗传性高低密度脂蛋白并胆固醇血症模型 等，但到目前为止尚未形成一种公认可靠的VP 模型。因此，建立一种简便易行、成本低廉、 重复性好、易于评价的VP 模型，对于VP 的研究将具有重要意义。 2. 材料和方法 2.1 动物及分组 体重2.0±0.2 kg 的24 只普通级雄性日本大耳白家兔由北京维通利华实验动物技术有限 公司提供，适应性喂养1 周后，按抽签法随机分成对照组（8 只）和实验组（16 只）。对照 组给予普通饲料；实验组给予高胆固醇饲料（配方：1%胆固醇+5%蛋黄+5%猪油+89%普通 饲料）、注射牛血清白蛋白及行球囊拉伤术。两组家兔均不限制饮水。 2.2 仪器与主要试剂 Humaly2er Company 200 型半自动生化分析仪；芬兰酶标仪 Thermo MULTIRSKAN MK3 ；武汉同济医科大学HMIAS －2000 高清晰度彩色病理图像分析系统；兔氧化低密度脂 蛋白（ox-LDL ）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 、白介素-1 （IL-1 ）、白介素-10 （IL-10 ）ELISA 试 1本课题得到国家自然科学基金资助（面上项目：四妙勇安汤促血管生成治疗络病的细胞分子生物学研究 ）的资助。 - 1 - 剂盒购自天津灏洋生物制品科技有