原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
农业生物技术学报
·研究论文·
ANKL *
鸡破骨细胞分化因子(chR )的克隆、表达和活性分析
**
, , ,
王 艳 姚 静 张风荣 侯加法
210095
(南京农业大学动物医学院,南京 )
GallusdomesticusRNA RT-PCRSOE-PCR
摘要:以鸡( )成骨细胞总 为模板,利用 和 技术体外扩增鸡破骨细胞分化因子
RANKL PCR pET-32a(+)--D IPTG
( )基因,将 产物克隆至组氨酸标签的融合蛋白表达载体 ,在异丙基 β 硫代半乳糖苷( )诱导
chRANKL
下,实现了 的有效表达,表达产物纯化后稀释成不同浓度梯度作用成熟破骨细胞观察其生物学活性。结果表明,凝
PCR 1200bp GenBank RANKL
胶电泳显示 扩增产物的长度为 左右,插入片段与 上报道的鸡 序列完全一致。重组表达载体转
BL21 IPTG 64kD Western
化 后经 诱导获得大小约为 的重组蛋白, 印迹表明重组蛋白能与抗组氨酸抗体相结合,具有特异反
应性;并且纯化后的蛋白能刺激成熟破骨细胞,使骨吸收指数呈剂量依赖性增加,表明具有一定的活性。
chRANKL
关键词:鸡破骨细胞分化因子( );基因克隆;原核表达
中图分类号:S188 :A :1006-1304(2008)01-0032-05
文献标识码 文章编号
ActivatorofNF-BLigand
κ (chRANKL)
( )
theDNAsequenceencodingthechickensreceptoractivatorofNF-
κ
toresorbbone.
Keywords:chRANKL;genecloning;prokaryoticalexpression
receptoractivatorof
鸡破骨细胞分化因子 ( 体外实验证实该重组蛋白可以激活体外培养成熟破
NF-BligandRANKL Wongetal.1998骨细胞的骨吸收活性。
κ , ),同时被 ( )
和Andersonetal.1998
( )发现,是重要的骨代谢调
1 材料和方法
节因子,已成为代谢性骨病领域的研究热点。RAN-
KL RANKreceptoractivatorofnuclearfactor1.1
可与 ( 实验材料
B 24 96
κ)特异性结合后加强促进破骨前体细胞的分化、
文档评论（0）