第 十 三 章 基发因表达调控.pptVIP

第 一 节基本概念与原理 第 三 节  原核基因表达调节 A simplified lac operon model. Positive and negative regulation of the lac operon 第四节  真核生物基因表达的调节 Evolution of understanding of eukaryotic transcription mRNA 阻遏蛋白 I DNA Z Y A O P pol 没有乳糖存在时 （二）阻遏蛋白的负性调节 阻遏基因 mRNA 阻遏蛋白 有乳糖存在时 I DNA z y a O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 半乳糖 β-半乳糖苷酶 乳糖操纵子被诱导物开放 P329 + + + + 转录 无葡萄糖，cAMP浓度高时 有葡萄糖，cAMP浓度低时 Z Y A O P DNA CAP CAP CAP CAP CAP CAP CAP CAP结合位点 （三）CAP的正性调节 没有CAP存在时，RNA聚合酶很少或完全不能结合启动序列 Polycistronic mRNA: The three genes Z, Y, and A are coordinately expressed. Negative regulation: The product of the I gene, the repressor, blocks the expression of the Z, Y, and A genes by interacting with the operator (O). 3. The inducer can inactivate the repressor, thereby preventing interaction with the operator. When this happens, the operon is fully expressed. （四）协调调节 ※当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用； ※如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。 单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源； 若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。 葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏(catabolic repression)。 低葡萄糖、低乳糖 葡萄糖与乳糖共存 高葡萄糖、低乳糖 单独存在乳糖 Lac阻遏蛋白负性调节与cAMP正性调节两种机制协调合作 P331 ① 以转录起始为主要调控点； ② 操纵子是大多数基因簇的调控方式，主要以代谢酶类作为受调控对象； ③ 以负调控居主要优势，由诱导物解除阻遏； ④ 多顺反子mRNA 只在原核生物出现； ⑤ 相当多基因属于组成型表达(constitutive expression)，即在整个生活过程中以恒定而适当的速率表达。这些基因在真核生物也称为管家基因(house keeping gene)。 原核生物基因表达调控的特点： Regulation of Eukaryotic Gene Expression P332 一、真核基因组结构特点 （一）真核基因组结构庞大 哺乳类动物基因组 DNA 约 3 × 10 9 碱基对 编码基因约 有 25000 个，占总长的1 % rDNA等重复基因约 占 5% ~ 10% （二）单顺反子 单顺反子(monocistron) ：即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。 （三）重复序列 单拷贝序列（一次或数次） 高度重复序列（106 次） 中度重复序列（103 ~ 104次） 多拷贝序列 （四）基因不连续性 二、真核基因表达调控特点（自学） （一） RNA聚合酶 （二）活性染色体结构变化 （三）正性调节占主导 （四）转录与翻译分隔进行 （五）转录后加工、修饰 二、真核基因表达调控特点 （一）RNA聚合酶 RNA polymerases I, II and III transcribe rRNA, mRNA and tRNA genes, respectively TBP (TATA-binding protein) （二）活性染色体结构变化 1. 对核酸酶敏感 活化基因常有超敏位点，位于调节蛋白结合位点附近。 Digestion of chromatin with DNase I. 2. DNA拓扑结构变化 天然双链DNA均以负性超螺旋构象存在； 基因活化后 3. DNA碱基修饰变化 真核DNA约有5%的胞嘧啶被甲基化， 甲基化范围与基因表达程度呈反比。 4. 组蛋白变化 ① 富含Lys组蛋白水平降低 ② H2A, H2B二聚体不稳定性增加 ③ 组蛋白修饰 ④