第二章 紫外可见分光光度法..pptVIP

　　 1.概念：分光光度法是根据物质的吸收光谱和光的吸收定律，对物质进行定量、定性分析的一种仪器分析方法。 　　 2.方法分类： 根据测定时所选用的光源： 　　?可见分光光度法(400?800nm) 　　?紫外分光光度法(200?400 nm) 　　?红外分光光度法(800nm?50?m) 　　 第一节 紫外可见分光光度计的构造 分光光度计工作原理： 采用一个可以产生多个波长的装置，通过系列分光装置，得到一束平行的波长范围很窄的单色光，透过一定厚度的试样溶液后，部分光被吸收，剩余的光照射到光电元件上，产生光电流，在仪器上可读取相应的吸光度或透光率，完成测定。 一．紫外可见分光光度计的基本组成 1．光源 　　 在所需光谱区域内发射连续的、足够强度、稳定的辐射光。 　　 可见区：钨灯；紫外区：氢灯、氘灯 通常用6～12 V钨丝灯作可见光区的光源，最适宜的使用范围在360—800nm。光源应该稳定，即要求电源电压保持稳定。为此，通常在仪器内同时配有电源稳压器。 色散原理：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同分光 棱镜是根据光的折射原理而将复合光色散为不同波长的单色光，然后再让所需波长的光通过一个很窄的狭缝照射到吸收池上。它由玻璃或石英制成。玻璃棱镜用于可见光范围，石英棱镜则在紫外和可见光范围均可使用。 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 光栅是根据光的衍射和干涉原理将复合光色散为不同波长的单色光，然后再让所需波长的光通过狭缝照射到吸收池上。它的分辨率比棱镜大，可用的波长范围也较宽。 入射狭缝：光源的光由此进入单色器，用于限制杂散光进入单色器 准直镜：透镜或凹面反射镜，使入射光成为平行光束 色散元件：棱镜或光栅，将复合光分解成单色光 准直镜：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝 出射狭缝：用于限制通带宽度 3．吸收池 　　吸收池也称比色皿，用于盛放参比溶液或待测溶液。它是由无色透明、耐腐蚀、化学性质相同、厚度相等的玻璃制成的，按其厚度分为0.5 cm，1 cm，2 cm，3 cm和5 cm。在可见光区测量吸光度时使用玻璃吸收池，紫外区则使用石英吸收池。使用比色皿时应注意保持清洁、透明，避免磨损透光面。 使用时注意点 4．检测器 检测器的作用是接受从比色皿发出的透射光并转换成电信号进行测量。分为光电管和光电倍增管。 光电管是一个真空或充有少量惰性气体的二极管。阴极是金属做成的半圆筒，内侧涂有光敏物质，阳极为一金属丝。光电管依其对光敏感的波长范围不同分为红敏和紫敏两种。红敏光电管是在阴极表面涂银和氧化铯，适用波长范围为625—1 000nm；紫敏光电管是阴极表面涂锑和铯，适用波长范围为200—625nm。 光电倍增管是由光电管改进而成的，管中有若干个称为倍增极的附加电极。因此，可使光激发的电流得以放大，一个光子约产生106～107个电子。它的灵敏度比光电管高200多倍。适用波长范围为160～700 nm。光电倍增管在现代的分光光度计中被广泛采用。 5．显示装置 显示装置的作用是把放大的信号以吸光度A或透光率T的方式显示或记录下来。分光光度计常用的显示装置是检流计、微安表、数字显示记录仪。 双光束分光光度计 双波长分光光度计 三、仪器使用基本流程 第二节 紫外可见分光光度法的定性分析 1．分子吸收光谱的产生 当一束光照射到某物质或某溶液时，组成该物质的分子、原子或离子等粒子与吸光子作用，光子的能量发生转移，使这些粒子由低能量轨道跃迁到高能量轨道，即由基态转变为激发态。 M(基态) + h? ? M*(激发态) M(基态) + h? ? M*(激发态) 　　这个过程即是物质对光的吸收。由于分子、原子或离子的能级是量子化的，不连续的，只有光子的能量(h?)与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差(?E)相等时，才能被吸收。 　　不同物质的基态和激发态的能量差不同，选择吸收光子的能量也不同，即吸收的波长不同。 2、光的种类 ?具有单一波长的光叫单色光，比如红光，蓝光等。 ?由不同波长的光组成的光叫复色光。比如日光等 ?如果两种适当颜色的单色光按适当的强度比例混合能得到白光，则这两种颜色的光叫做互补色光。 　　 互补色光 　　 溶液的光吸收曲线 最大吸收波长 ?max KMnO4溶液的?max=525nm 特点: ① 具有最大吸收波长。 ②不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似，?m