叶用莴苣幼苗幼叶总蛋白SDS-PAGE.PDFVIP

中国农学通报 2012,28(31): 153-156 Chinese Agricultural Science Bulletin 叶用莴苣幼苗幼叶总蛋白SDS 和Western-blot方法的优化 李 洋，韩莹琰，范双喜，陈曙红 （北京农学院植物科学技术学院，北京102206） 摘 要：为建立一套适合叶用莴苣(Lactuca sative L.)热激蛋白研究的SDS和Western-blot 方法。以 叶用莴苣W7 为材料，采用改进的TCA/Acetone 法提取叶片蛋白，比较了2 种电压下SDS 凝胶分离蛋白 质的效果，使用4℃保存2 周的抗体稀释液，并且得到了较清晰的热激蛋白70 和内参蛋白Rubisco 条带， 初步确定了叶用莴苣叶片热激蛋白的western-blot 实验条件。 关键词：叶用莴苣；热激蛋白；Western-blot 中图分类号：S636.2 文献标志码：A 论文编号：2012-0179 OptimizationofSDSandWestern-blotforTotalProteinin SeedlingYoungLeavesofLactucasativeL. Li Yang, Han Yingyan, Fan Shuangxi, Chen Shuhong (DepartmentofPlantScienceandTechnology,BeijingUniversityofAgriculture, Beijing 102206) Abstract:In order to establish a method SDSand Western-blot suitable for heat shock protein study of Lactuca sative L., with leaves of Lactuca sative L. (W7) as material, the author used improved TCA/Acetone method extracted leaf protein, compared protein separating effect in SDS gel in two different volt, obtained clear bands of HSP70 and rubisco using anti-body diluent stored 2 weeks at 4℃, optimized and preliminary established Western-blot experiment condition of heat shock protein of Lactuca sative L. young leaves. Keywords:Lactuca sative L.; heat shock protein; Western-blot [7-8] 0 引言 胞应对各种胁迫 。蛋白质免疫印记(Western-blot)通 叶用莴苣(Lactuca sative L.) ，喜冷凉气候，不耐高 过电泳、免疫标记分离检测蛋白质，是一种常用的检测 温，培育耐热的叶用莴苣优良品种成为亟待解决的问 蛋白质的方法。目前国内外对于叶用莴苣的研究大多 题。热激蛋白又称为热休克蛋白，保护生物体有机体 报道生理、基因和栽培方面，鲜有直接研究耐热性的报