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- 2019-01-12 发布于福建
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动物基因组dna的相分离定量叶1
凝胶上样缓冲液(6×) 蔗 糖 40% 溴酚蓝 0.25% 点 样 电 泳 注意观察溴酚蓝染液的迁移 紫外灯下观察电泳结果 照 相 电泳注意事项 1. 琼脂糖的质量: 琼脂糖(agarose)是以质量较好的琼脂作原料制成的。琼脂是由琼脂糖和琼脂胶组成的复合物。琼脂胶是一种含有硫酸根和羟基的多糖。它具有离子交换性质,这种性质将给电泳带来电渗作用的不良影响,因而必须去除干净。所谓琼脂糖的质量不过关就是琼脂糖内含有较高比例的琼脂胶。琼脂糖是一种直链多糖,它由D-半乳糖和3,6-脱水-L-半乳糖的残基交替排列组成的线性多聚糖。由于链状琼脂糖分子相互以氢键交联,因此与琼脂一样能形成凝胶。琼脂糖带有亲水性,不含有带电荷的基因,不引起DNA变性,又不吸附被分离的物质,因此它是一种很好的凝胶剂。 2. DNA分子的迁移率: 影响DNA分子在电泳中的迁移率的因素是多方面的,除了决定于DNA分子大小与构型外,还有琼脂糖的浓度、电压大小、缓冲液pH值和电泳时的温度等。为了精确测定其分子量的大小,采用一下措施: (1) 每次测定时,要有已知分子量的DNA片段作为标准, 进行对照。电泳。 (2) 选择最合适的电泳条件。 (3) 提高分子筛效应,降低电荷效应。 3.
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