2.1微生物实验室培养.pptVIP

到目前为止， 几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖 都与微生物学有关;微生物的类群;专题2 微生物的培养与应用;了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。;基础知识梳理;(1)固体培养基、液体培养基和半固体培养基 ①固体培养基：（观察菌落和分离提纯微生物） 在一般培养温度下呈固体状态的培养基。 一类是用天然的固体状物质制成的，如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基，酒精厂、酿造厂等常用这种培养基； 另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等。 ②液体培养基或培养液或发酵液：（工业大规模培养 ） 呈液体状态的培养基。液体培养基因营养物质分布均匀，与菌体表面接触充分，还能大量溶解微生物的代谢产物等优点，广泛用于微生物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。 ③半固体培养基：（观察微生物的运动）加入少量的凝固剂(如0.2％～0.5％的琼脂)而制成的培养基。这种培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。 ;几种菌落及其形态;几种菌落及其形态;;（2）天然培养基和合成培养基 ①天然培养基：（工业生产降低成本） 主要取自动物体液或从动物组织分离提取。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，缺点是成分复杂，来源受限。天然培养基/液的种类很多，包括生物性液体（如血清）；组织浸液（如胚胎浸液）；凝固剂（如血浆）等。 ②合成培养基：（菌种的分类，鉴定，营养、代谢 ，遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的研究）是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的。其所含的成分（包括微量元素在内）以及他们的量都是确切可知的。;（三）选择培养基和鉴别培养基： ①选择培养基：配制特点：添加或减少某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物的生长。从而使后者从含有杂菌的标本中分离出。（即筛选你??需要培养的微生物，令其生长，其余微生物不生长 ） 例如： (1)基本的培养基通过加青霉素，实现分离纯化酵母菌、霉菌；（2）加高浓度的食盐分离纯化金黄色葡萄球菌（有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长 ）（3）无氮培养基可分离纯化固氮菌（固氮细菌 ）。（4）不含有机碳的培养基可分离纯化自养型细菌如硝化细菌。 ;②鉴别培养基： 配制特点：在培养基中加入某种指示剂或化学药品，以鉴别不同种类的微生物。（即只能鉴别出你此种微生物是不是你所需要的微生物，而不能抑制其余种类的微生物生长 ） 例如：伊红美蓝培养基 （1）用途：伊红美篮培养基一般用于检测饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。 （2）原理：伊红为酸性染料，美篮为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美篮结合形成紫黑色菌落，并带有金属光泽。 ;;（二）培养基配制原则：;微生物需要的四大类营养要素物质是：;①无机氮源：N2、NH4+氨盐、NO3-硝酸盐、NH3。;碳源、氮源、生长因子的比较;牛肉膏当中含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类。的水溶性物质。;1.无菌范围：;耐高温需保持干燥的 物品，160～170℃ 1～2小时;灼烧灭菌;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？; 例1、下列物质可作为培养硝化细菌碳源、氮源和能源的依次是?? （??? ） A含碳无机物、氨、氨??B含碳无机物、氮、硝酸盐 C含碳有机物、氨、光??D含碳有机物、硝酸盐、氨 例2 、要将土壤中的自生固氮菌（如原褐固氮菌）与其它细菌分离出来，应将它们接种到（?? ） A．加入指示剂的鉴别培养基??????? B．含有蛋白胨的固体培养基 C．没有有机氮的选择培养基??????? D．营养要素全面的液体培养基;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方;倒平板;1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;㈡纯化大肠杆菌：;将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______;;问题讨论;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;6支试管，分别加入9ml无菌水;b.涂布平板：;2.菌种培养：;四.菌种的保藏：;例3、某同学在做微生物实验时，不小心把原褐固氮菌和酵母菌混在一起，为了得到纯度较高的酵母菌，配制好的培养基中应再加入?（???? ）A．高浓度的食盐????? B．硝??盐