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(4)、水 水在微生物中的作用 1.水是微生物新陈代谢不可或缺的物质 2.水也是微生物自身生存需要依赖的物质基础 3.水可以保持微生物自身生存环境的平衡 4.水也是微生物与微生物之间,进行物质交换必要的媒介 (5)、微生物的特殊营养物质(生长因子) 概念 来源 作用 特殊营养物质 酶、核酸等的组成成分 微生物生长不可缺少的微量有机物 维生素、氨基酸、碱基等 天然物质包括:酵母膏,蛋白胨,动植物组织提取液等 总结: 不管哪种培养基,一般都含有碳源、氮源、水、 无机盐、生长因子等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH 、氧气、特殊营养物质的要求. 3、培养基的类型 标准 培养基类型 配制特点 主要应用 物理性质 固体培养基 加入琼脂较多 微生物的分离、计数等 半固体培养基 加入琼脂较少 观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等 液体培养基 不加入琼脂 工业生产,连续培养 化学组成 合成培养基 由已知成分配制而成, 培养基成分明确 菌种分类、鉴定 天然培养基 由天然成分配制而成, 培养基成分不明确 工业生产 目的用途 鉴别培养基 添加某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物 选择培养基 添加(或缺少)某种化学物质 培养、分离出特定的微生物 固体培养基 半固体培养基 液体培养基 主要用于微生物的分离、计数等 主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等 主要用于工业生产 需加入凝固剂,如琼脂 培养基的种类 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 据物理性质分 天然培养基 合成培养基 据化学成分分 选择培养基 鉴别培养基 据用途分 常用于工业生产 常用于观察微生物的运动、鉴定菌种 用于微生物的分离、计数 常用于工业生产 常用于分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。例如,在培养基中加入青霉素,以抑制细菌、放线菌的生长,从而分离到酵母菌和霉菌。又如,在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长。 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成,用以鉴别不同种类的微生物。例如,在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌:如果有大肠杆菌,其代谢产物就与伊红和美蓝结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。 选择培养基 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入以纤维素为唯一碳源的培养基 分离出分解纤维素的细菌 4、培养基的配制原则: ①目的要明确:根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。 ②营养要协调:培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。例如:碳氮比4∶1时,谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少;碳氮比为3∶1时,菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。 ③pH要适宜:细菌培养基pH中性或偏碱性,霉菌培养基呈酸性。 细菌pH为:6.5-7.5; 放线菌pH为:7.5-8.5; 真菌pH为:5.0-6.0 二、无菌技术 1.无菌技术的概念: 无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。 消毒定义: 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 灭菌定义: 是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽胞、孢子)。 是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽胞和孢子。 1、常用消毒的方法: 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用70%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 …… 1、灼烧灭菌: 2、干热灭菌:160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min. 2、常用灭菌的方法: 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。 常识 1. 无菌技术包括: (1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ; (2)将培养器皿、接
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