基因工程对第三章克隆载体-2.pptVIP

第二节 病毒载体 virus vector 什么是病毒? 病毒：由DNA（或RNA）和外壳蛋白组成，经包装后成为病毒颗粒。 λ 噬菌体（Bacteriophage lambda） （2）λDNA 有56个限制酶识别序列，50个基因， 左臂，右臂和中央片段，中央片段可以被替代。 (3)、 λ 噬菌体的侵染 1.2、λ噬菌体载体的构建 （1）切去λDNA的中央片段 （2）插入标记基因（marker gene） 例如：lacZ 基因，转化的菌斑在含有X-gal的培养基因上表现篮色. （3）插入外源基因（foreign gene） 可插入20kb的目的基因。 （4）建立λDNA体外包装系统（packing system） 包装后方可侵染. 2、 柯斯质粒载体（Cosmid vector） 2.1 含义：含有λ噬菌体粘性末端（cos位点）的质粒，又称粘粒 2.2 特点： 带有cos 位点 4-6kb 有标记基因 常用于构建cDNA文库（cDNA library） 可携带大的基因片段，45kb。 2.3 构建过程 第三节、染色体定位整合载体 基因整合平台系统：包括整合平台和定位整合克隆载体。 整合平台：受体细胞基因组上给定的一个DNA区域，是外源DNA定位整合的位置。 定位整合克隆载体：质粒克隆载体，有一个或两个与整合平台DNA区域同源的DNA片段。 一、定位整合模式 二、定位整合效率