石杉碱甲人工抗原的合成,鉴定及免疫原性分析.docVIP

石杉碱甲人工抗原的合成鉴定及免疫原性分析 宋建武1，晁　志2*，董为人1 南方医科大学1基础医学院组织学与胚胎学教研室，2中医药学院，广东 广州 510515 摘要：目的　制备乙酰胆碱脂酶抑制活性成分石杉碱甲（Huperzine A， HupA）的人工抗原及抗血清，为制备HupA 的单克隆抗体、建立快速检测HupA 的酶联免疫吸附测定（ELISA）法提供技术基础。 方法　将HupA与戊二醛、载体蛋白牛血清白蛋白（BSA）反应偶联，制得半抗原－载体蛋白复合物后，用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定其中结合的半抗原数目；以此抗原免疫BALB/c 小鼠，制备抗血清，并通过ELISA 法检测其抗体效价和特异性。 结果　合成的人工抗原HupA-GA-BSA 中HupA与BSA的结合比约为8:1；免疫小鼠得到特异针对HupA 的抗血清，HupA抗体的效价为1: 6250。 结论　成功地合成了HupA的人工抗原，且该抗原有较好的免疫原性。 关键词：石杉碱甲；半抗原-载体蛋白复合物；免疫原性；基质辅助激光解吸飞行时间质谱；酶联免疫吸附测定 Synthesis of huperzine A-bovine serum albumin conjugate and its immunogenicity analysis in mice SONG Jian-wu 1, CHAO Zhi 2, DONG W